请问在做完western blot 后,用图像分析软件得到光密度值,接下来怎么做统计分析,要详细的步骤
来源:学生作业帮 编辑:搜搜考试网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/13 23:31:29
请问在做完western blot 后,用图像分析软件得到光密度值,接下来怎么做统计分析,要详细的步骤
Western Blot原理
Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测.对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测.
N E.h+l/g#c"b%B-[&Aâ?ѻ?ϭwww.genecool.com 推荐书籍:《分子克隆》、《抗体技术实验指南》、Antibodies(a laboratory manual,wrote by Ed Harlow ,david lane)、《蛋白电泳实验技术》、《蛋白质技术手册》等.
与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗.经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变.以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分.该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达.
网上关于这个实验的内容还是比较多的,推荐可以去这里看看,应该还算不错
Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测.对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测.
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与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗.经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变.以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分.该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达.
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western blot做完以后怎么分析
做western blot用的tris缓冲液ph一般要求在7左右,我配的10X的tris,请问稀释成1X后,ph值会变么
western blot的条带分析
western blot 具体操作步骤
western blot的实验原理(详细的)
求做western blot时提取贴壁细胞总蛋白详细的protocol
western blot 的原理及操作步骤、应用有哪些?
western blot如何分析结果?
western blot的具体步骤?
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请问这怎么做?要步骤详细.