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您好 您的TMB显色液的配制方法可以告诉我吗

来源:学生作业帮 编辑:搜搜考试网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/06/14 15:25:37
您好 您的TMB显色液的配制方法可以告诉我吗
我最近在做HPR的TMB显色作用 用的是TMB干粉 然后用DMSO配成1mg/ml 之后按100:900 加入0.1M柠檬酸与0.2M 磷酸氢二钠 混合缓冲液,但是刚加入缓冲液之后 TMB直接变成了蓝色溶液 这是不是发生了显色?一直很苦恼这个问题
您好 您的TMB显色液的配制方法可以告诉我吗
试试我的配方吧:
底物显色A液:醋酸钠13.6g ,柠檬酸1.6g,30%双氧水0.3ml,蒸馏水加至500ml.
底物显色B液 :乙二胺四乙酸二钠0.2g,柠檬酸0.95g,甘油 50ml,取0.15g TMB溶于3mlDMSO中,蒸馏水加至500ml.
注意避光保存,使用的时候根据需要量取等量AB液混匀后使用,如果用量小的话建议AB液各配100ml就绰绰有余了.TMB水溶解性不好,所以要溶于有毒的DMSO或者乙醇中,如果改用TMB*HCl,则可直接溶于水中,如果TMB质量不理想出现大量不溶现象的话就稍微增加TMB的量,一般而言也不影响显色的(个人经验).我配出来的显色效果一点都不必名牌显色试剂盒差哦:)