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请教如何计算引物的Tm值?

来源：学生作业帮 编辑：搜搜考试网作业帮 分类：英语作业 时间：2024/06/05 23:20:59
请教如何计算引物的Tm值?
最好能给出计算公式等.
请教如何计算引物的Tm值?
博凌科为-为你先看一下Tm的定义：Tm = Temperature at which 50% of a given oligonucleotide is hybridized to its complementary strand.In the absence of destabilizing agents,like formamide or urea,Tm will depend on 3 major parameters:The sequence:a GC-rich sequence has a higher melting temperature.The strand concentration:high oligonucleotide concentrations favor hybrid formation,which results in a higher melting temperature.The salt concentration:high ionic strength results in a higher Tm as cations stabilize the DNA duplexes.引物设计软件都可以给出Tm,引物长度,碱基组成,引物使用缓冲的离子强度有关.长度为25mer以下的引物,Tm计算公式为：Tm = 4℃(G + C)+ 2℃(A + T)对于更长的寡聚核苷酸,Tm计算公式为：Tm = 81.5 + 16.6 x Log10[Na+] + 0.41 (%GC) 600/size公式中,Size = 引物长度.
请教如何计算引物的Tm值? 引物的TM值如何计算 如何计算引物的Tm值? 引物的Tm值是什么 如何理解Tm= 4(G+C)+2(A+T).比如说一段引物的G+C含量为40%,那么这段引物的Tm值是多少? 引物的退火温度如何计算,用tm值减去5度,靠谱不?用1m na+的还是50mmna+? 引物的长度包括酶切位点在内么?计算Tm值以及计算GC含量时用算酶切位点的么? 我的引物该如何选择?我要设计兼并引物,但是两个最佳位置处的引物Tm值相差较大,而且有二聚体和发卡结构,其余的位置兼并位点 PCR中Tm值如何计算? 请教如何计算出兼并引物的退火温度 为什么做PCR设定引物退火温度时设定的退火温度要比合成引物得到的引物Tm值低几度? PCR中 两个引物的Tm值相差太大有什么害处?