搜搜考试网高效液相做专属性实验时,溶剂峰和目标峰出峰时间一样怎么办?
来源：学生作业帮 编辑：搜搜考试网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/06/16 12:49:51
高效液相做专属性实验时,溶剂峰和目标峰出峰时间一样怎么办?
你用的稀释剂是纯的有机相吗?稀释剂中有机相的比例一般尽可能与流动相一致,以减小溶剂效应.如果改变稀释剂仍不能改善,则说明你的色谱条件不合适,检测组分在色谱柱中几乎无保留.如果你的化合物是离子型的,一般需要使用缓冲盐,缓冲液pH值应在化合物pKa值正负2之外,以增强组分在色谱系统中的保留.如果不是离子型化合物,则减少有机相比例,以增加组分保留时间,避开溶剂峰.
再问： 你好，我分离的是氨基酸类物质，不是离子型化合物，流动相用的甲醇和水，也是用流动相配的溶剂，但是比例有少许差别，单进溶剂时确实有溶剂峰，用流动相配的样品可以和溶剂峰分开，我在做肠灌流实验，但是当样品进入动物体内灌流后，进样后就分不开了，我想把样品的出峰时间延长一些，认为能分开，但是不知道怎么调整，实在没办法。懂得前辈帮帮忙，拜托啦。。。
再答： 氨基酸类物质是两性化合物，出峰时间跟pH值有很大关系，样品经过动物体内后，pH值肯定是发生了变化的，样品的预处理就很重要了（这个你要请教其他高人，我没做过生物方面的药物分析）。如果你只是想单独延迟样品出峰时间，可以试着减少有机相比例，看能不能达到效果，如果不行，可能还是要用缓冲体系。
再问： 你好，我分离的是氨基酸类物质，不是离子型化合物，流动相用的甲醇和水，也是用流动相配的溶剂，但是比例有少许差别，单进溶剂时确实有溶剂峰，用流动相配的样品可以和溶剂峰分开，我在做肠灌流实验，但是当样品进入动物体内灌流后，进样后就分不开了，我想把样品的出峰时间延长一些，认为能分开，但是不知道怎么调整，实在没办法。懂得前辈帮帮忙，拜托啦。。。
再答： 氨基酸类物质是两性化合物，出峰时间跟pH值有很大关系，样品经过动物体内后，pH值肯定是发生了变化的，样品的预处理就很重要了（这个你要请教其他高人，我没做过生物方面的药物分析）。如果你只是想单独延迟样品出峰时间，可以试着减少有机相比例，看能不能达到效果，如果不行，可能还是要用缓冲体系。