搜搜考试网cik细胞疗法,cik细胞疗法具体治疗的方法!
来源：学生作业帮 编辑：搜搜考试网作业帮 分类：综合作业 时间：2024/04/29 02:28:35
cik细胞疗法,cik细胞疗法具体治疗的方法!
DCCIK细胞抗肿瘤的基础研究及临床应用进展,309国际肿瘤治疗中心为您详细介绍：
树突状细胞(dendritic cells,DC)分布于除脑和睾丸以外的身体的任何组织,是目前所知的功能最强大的专职抗原递呈细胞(antigen presenting cells,APC),亦是体内唯一具有激活幼稚T淋巴细胞诱导初次免疫应答能力的APC.
细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced kil1er,CIK)是将人外周血单个核细胞在体外用多种细胞因子(如抗IFN、CD3McAb、IL-2、IL—la等)共同培养后获得的一群异质细胞.由于这种细胞同时表达CD3和CD56两种膜蛋白分子,故又称自然杀伤(NK)细胞样T淋巴细胞,兼具有T淋巴细胞强大的杀瘤活性和NK细胞的非主要组织相容性复合体(major histo—corn—patibility complex,MHC)限制性杀瘤特点旧1.它是迄今发现的所有免疫效应细胞中,增殖能力最强、细胞毒活性较强的细胞.
1 CIK/DC细胞的生物学特性及抗肿瘤机制
成熟的DC细胞表面有许多树突样不规则突起,表面具有丰富的有助于抗原提呈的分子,如MHC I、Ⅱ类分子,共刺激分子B7-l、B7—2,细胞黏附分子ICAM．1、ICAM．3以及淋巴细胞功能相关抗原LFA-1.LFA-3等.在混合淋巴细胞反应中,既能激活MHC相同的自身反应性T细胞,又能激活MHC不同的同种反应性T细胞,而其最大特点是能够显著刺激初始型T细胞(Naive T cells)增殖并建立初级免疫应答,具有向局部淋巴细胞T细胞区迁移的能力.DC细胞激发T细胞增殖及抗原递呈能力是巨噬细胞和B细胞的100—1000倍.体外培养获得的DC与纯化的体内成熟DC具有同样的抗原递呈功能,这是DC用于临床治疗恶性肿瘤的基础.
CIK抗肿瘤作用机制还未完全明了,目前的研究显示CIK可通过3种途径发挥杀瘤,溶瘤的作用,即:①CIK细胞对肿瘤细胞的直接杀伤作用｡可能是通过黏附因子lfa/icam-1途径与肿瘤细胞结合后,分泌含大量blt酯酶的颗粒｡这些颗粒能穿透靶细胞膜,导致肿瘤细胞的裂解｡②进入体内活化的CIK细胞可分泌多种细胞因子,不仅对肿瘤细胞有直接抑制作用,而且还可通过调节免疫系统间接杀伤瘤细胞｡此外,CIK细胞还能分泌Il-2､Il-6､Inf-α及gm-csf等一些细胞因子,增强细胞毒作用｡③诱导肿瘤细胞凋亡及坏死｡CIK细胞能活化肿瘤细胞凋亡基因,使得flip､bcl-2､bcl-xl､dad1和survivin基因表达上调｡此外,CIK细胞表达的fasl可诱导肿瘤细胞凋亡,但由于此细胞有抗凋亡基因的表达,因此在体内能抵抗fasl阳性肿瘤细胞对CIK的反作用,故CIK能对肿瘤细胞发挥持久的溶瘤作用｡
肿瘤患者一般存在功能性的DC缺乏.肿瘤细胞对这些免疫效应细胞发生抵抗导致过继免疫治疗疗效不佳,而DC作为体内功能强大的专职抗原递呈细胞,在细胞毒性T细胞的活化过程中发挥着重要的作用.因此,设想可将CIK细胞和DC联合起来治疗恶性肿瘤,从而发挥协同抗肿瘤作用.而且实验还证实,DC与CIK细胞通过共培养可降低CIK细胞群中的免疫抑制T细胞(Treg即CD4+CD25+细胞)而达到削弱Treg对抗肿瘤免疫细胞的抑制作用.
CIK细胞和DC共培养能显著增加树突状细胞和共刺激分子递呈抗原的特异性.此外,两者共培育还能促进树突状细胞IL-12的分泌和CIK细胞的细胞毒性,而IL-12摄取阻断则会减弱CIK细胞的细胞毒性.DC可促进CIK细胞高表达CD28和CD40及其配体(CD40L),这对介导DCCIK细胞的细胞毒活性有重要意义.研究中观察到DC与CIK细胞的共培养会增加CIK细胞的CD3+CD56+双阳性细胞的比例和杀瘤活性可能与DC高分泌IL-12,使培养体系中IL-12水平增高有关.而IL-12能诱导CIK细胞分泌IFN-γ,按进一步激活NKT细胞和诱导ThI型免疫应答.
2 DCCIK细胞在肿瘤治疗中的基础及临床研究
迄今已应用DCCIK细胞对多种恶性肿瘤开展相关基础及临床研究,其中部分研究已经得到了一些令人鼓舞的结果.
2．1 消化系统肿瘤 用CAl99抗原负载成熟的DC,与CIK细胞共培养后,与同源同期的CIK细胞进行比较,发现其对CIK耐受的胰腺癌细胞杀伤活性有显著提高,与未经抗原肽处理的DC与CIK细胞共培养的细胞相比,杀伤活性也有提高,提示经共培养的CIK细胞中有抗原特异性CTL亚群的存在.
采集30例肝癌患者外周血分离出CIK细胞回输患者体内,23例出现发热,持续时间2—8h,大部分自行消退,无其他不良反应.CIK细胞治疗后CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD56+和CD25+细胞比例明显升高,而且DCl和DC2细胞的比例也上升,大部分患者临床症状明显改善.
利用抗原负载DC细胞刺激CIK细胞治疗进展期胃癌患者25例,25例均可评价疗效.研究结果显示全组无CR者,PR16例,SD 5例,PD 4例,总有效率64％(16／25).最常见的毒副反应为发热,发生率为48％(12／25),经对症处理后均好转.未见其他明显不良反应.
2. 2 呼吸系统肿瘤
对10例肺腺癌患者胸水来源树突状细胞和外周血CIK细胞共培养后的细胞毒活性研究发现,癌性胸腔积液中的DC前体细胞可在体外通过细胞因子诱导获得功能性的DC.用肿瘤细胞冻融抗原冲击癌性胸腔积液来源的DC可以增加CIK细胞的体外特异性杀伤力,在一定程度上抑制了肿瘤细胞的生长.
应用Dc和CIK共同培养后作用于肺腺癌细胞spe—A1的实验研究表明,CIK—A—DC的杀伤活性最强为91．3％,明显高于单纯CIK的59．7％和DCCIK的79．8％(P值分别为0．025和0．042),提示C1K-A．DC细胞对肿瘤杀伤的特异性.而DCCIK的杀伤活性为79．8％,也高于单纯CIK对照组59.7％(P=0．034),说明DC具有明显增强CIK细胞杀瘤活性的功能.
2．3 其他系统肿瘤
用负载自体肿瘤细胞裂解物的DC疫苗联合CIK治疗晚期肾癌10例,所有患者治疗2个月后CD3+、CD4+、CD4+／CD8+和CD56+均明显提高,说明负载自体肿瘤细胞裂解物的DC疫苗联合CIK细胞治疗能提高晚期肾癌患者特异性和非特异性的细胞免疫功能.治疗过程中除了个别患者出现了•过性的轻微发热和畏寒外,无明显不良反应发生.
从乳腺癌患者淋巴结中分离和诱导培养出DC细胞后,经自身肿瘤扰原冲击后能明显提高CIK细胞对自身肿瘤细胞的杀伤活性,其机制可能是通过CD3单抗激活CIK产生第一信号,DC表面CD80、CD40等共刺激分子提供第二信号,共同促发CIK的杀伤活性.束永前等心21应用CIK细胞与DC细胞联合治疗晚期各类实体肿瘤患者40例,症状均有不同程度的改善,而无明显毒副作用.
3 DCCIK细胞研究应用前景
? CIK细胞与有溶瘤作用的病毒相结合能产生强大的协同抗肿瘤作用,可一定程度上克服靶向生物治疗中存在的递呈及定向等难题,有望成为一种更为有效的肿瘤治疗方法｡CIK细胞过继免疫疗法作为一个新的治疗手段､治疗方案和标准,尚待进一步规范和统一｡作用机制､毒副作用､应用时机､给药途径和方法等问题有待进一步探讨｡但毫无疑问,细胞过继免疫治疗与手术､化疗､放疗有机结合,合理安排将为肿瘤治疗带来新的曙光｡
最新研究显示DC细胞与CIK细胞共培养后,提高了细胞的增殖速度和杀伤活性,且使其对肿瘤细胞的杀伤作用更具特异性.而且DCCIK细胞对于血液、消化、呼吸、泌尿及生殖系统等多个系统肿瘤细胞均有杀伤作用.
目前,常规进行CIK细胞、DC细胞或DC-CIK细胞的培养技术都是首先用血细胞分离机体外循环病人4000-8000毫升外周血,提取出外周血里的单个核细胞,然后在GMP实验室进行细胞培养获得具有抗癌活性的CIK、DC或DC-CIK免疫细胞.此过程中用血细胞分离机大剂量提取肿瘤病人外周血中的单个核细胞（幼稚细胞）可能会对病人的免疫系统造成损伤,临床操作时具有较大风险,很多肿瘤病人由于身体虚弱而无法完成此过程.要想克服这一困难,唯有运用极高极严格的的细胞培养技术.让肿瘤患者获得无风险无损伤的肿瘤免疫细胞治疗成为解放军309医院国际肿瘤治疗中心所有医护人员和研发人员的责任,经过两年多几百次的实验,终于取得了重大突破,实现了DC-CIK细胞的高效率培养,培养效率比常规技术提高了百倍.现在只需要采集病人40毫升左右的外周血,就可以培养出1010个DC-CIK细胞,明显优于常规的培养方法,其效应细胞CD3+CD56+高达30%以上.DC-CIK抗癌细胞实验表明,DC-CIK细胞的杀癌细胞的杀伤活性明显高于CIK细胞,与血细胞分离机采集PBMC方法培养的DC-CIK细胞癌细胞活性相当.
我们坚信,生物免疫细胞治疗已经开辟了癌症治疗的新天地,而309医院国际肿瘤治疗中心的最新一代DC-CIK肿瘤免疫细胞治疗技术,更是让广大患者看到了康复的希望!
树突状细胞(dendritic cells,DC)分布于除脑和睾丸以外的身体的任何组织,是目前所知的功能最强大的专职抗原递呈细胞(antigen presenting cells,APC),亦是体内唯一具有激活幼稚T淋巴细胞诱导初次免疫应答能力的APC.
细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced kil1er,CIK)是将人外周血单个核细胞在体外用多种细胞因子(如抗IFN、CD3McAb、IL-2、IL—la等)共同培养后获得的一群异质细胞.由于这种细胞同时表达CD3和CD56两种膜蛋白分子,故又称自然杀伤(NK)细胞样T淋巴细胞,兼具有T淋巴细胞强大的杀瘤活性和NK细胞的非主要组织相容性复合体(major histo—corn—patibility complex,MHC)限制性杀瘤特点旧1.它是迄今发现的所有免疫效应细胞中,增殖能力最强、细胞毒活性较强的细胞.
1 CIK/DC细胞的生物学特性及抗肿瘤机制
成熟的DC细胞表面有许多树突样不规则突起,表面具有丰富的有助于抗原提呈的分子,如MHC I、Ⅱ类分子,共刺激分子B7-l、B7—2,细胞黏附分子ICAM．1、ICAM．3以及淋巴细胞功能相关抗原LFA-1.LFA-3等.在混合淋巴细胞反应中,既能激活MHC相同的自身反应性T细胞,又能激活MHC不同的同种反应性T细胞,而其最大特点是能够显著刺激初始型T细胞(Naive T cells)增殖并建立初级免疫应答,具有向局部淋巴细胞T细胞区迁移的能力.DC细胞激发T细胞增殖及抗原递呈能力是巨噬细胞和B细胞的100—1000倍.体外培养获得的DC与纯化的体内成熟DC具有同样的抗原递呈功能,这是DC用于临床治疗恶性肿瘤的基础.
CIK抗肿瘤作用机制还未完全明了,目前的研究显示CIK可通过3种途径发挥杀瘤,溶瘤的作用,即:①CIK细胞对肿瘤细胞的直接杀伤作用｡可能是通过黏附因子lfa/icam-1途径与肿瘤细胞结合后,分泌含大量blt酯酶的颗粒｡这些颗粒能穿透靶细胞膜,导致肿瘤细胞的裂解｡②进入体内活化的CIK细胞可分泌多种细胞因子,不仅对肿瘤细胞有直接抑制作用,而且还可通过调节免疫系统间接杀伤瘤细胞｡此外,CIK细胞还能分泌Il-2､Il-6､Inf-α及gm-csf等一些细胞因子,增强细胞毒作用｡③诱导肿瘤细胞凋亡及坏死｡CIK细胞能活化肿瘤细胞凋亡基因,使得flip､bcl-2､bcl-xl､dad1和survivin基因表达上调｡此外,CIK细胞表达的fasl可诱导肿瘤细胞凋亡,但由于此细胞有抗凋亡基因的表达,因此在体内能抵抗fasl阳性肿瘤细胞对CIK的反作用,故CIK能对肿瘤细胞发挥持久的溶瘤作用｡
肿瘤患者一般存在功能性的DC缺乏.肿瘤细胞对这些免疫效应细胞发生抵抗导致过继免疫治疗疗效不佳,而DC作为体内功能强大的专职抗原递呈细胞,在细胞毒性T细胞的活化过程中发挥着重要的作用.因此,设想可将CIK细胞和DC联合起来治疗恶性肿瘤,从而发挥协同抗肿瘤作用.而且实验还证实,DC与CIK细胞通过共培养可降低CIK细胞群中的免疫抑制T细胞(Treg即CD4+CD25+细胞)而达到削弱Treg对抗肿瘤免疫细胞的抑制作用.
CIK细胞和DC共培养能显著增加树突状细胞和共刺激分子递呈抗原的特异性.此外,两者共培育还能促进树突状细胞IL-12的分泌和CIK细胞的细胞毒性,而IL-12摄取阻断则会减弱CIK细胞的细胞毒性.DC可促进CIK细胞高表达CD28和CD40及其配体(CD40L),这对介导DCCIK细胞的细胞毒活性有重要意义.研究中观察到DC与CIK细胞的共培养会增加CIK细胞的CD3+CD56+双阳性细胞的比例和杀瘤活性可能与DC高分泌IL-12,使培养体系中IL-12水平增高有关.而IL-12能诱导CIK细胞分泌IFN-γ,按进一步激活NKT细胞和诱导ThI型免疫应答.
2 DCCIK细胞在肿瘤治疗中的基础及临床研究
迄今已应用DCCIK细胞对多种恶性肿瘤开展相关基础及临床研究,其中部分研究已经得到了一些令人鼓舞的结果.
2．1 消化系统肿瘤 用CAl99抗原负载成熟的DC,与CIK细胞共培养后,与同源同期的CIK细胞进行比较,发现其对CIK耐受的胰腺癌细胞杀伤活性有显著提高,与未经抗原肽处理的DC与CIK细胞共培养的细胞相比,杀伤活性也有提高,提示经共培养的CIK细胞中有抗原特异性CTL亚群的存在.
采集30例肝癌患者外周血分离出CIK细胞回输患者体内,23例出现发热,持续时间2—8h,大部分自行消退,无其他不良反应.CIK细胞治疗后CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD56+和CD25+细胞比例明显升高,而且DCl和DC2细胞的比例也上升,大部分患者临床症状明显改善.
利用抗原负载DC细胞刺激CIK细胞治疗进展期胃癌患者25例,25例均可评价疗效.研究结果显示全组无CR者,PR16例,SD 5例,PD 4例,总有效率64％(16／25).最常见的毒副反应为发热,发生率为48％(12／25),经对症处理后均好转.未见其他明显不良反应.
2. 2 呼吸系统肿瘤
对10例肺腺癌患者胸水来源树突状细胞和外周血CIK细胞共培养后的细胞毒活性研究发现,癌性胸腔积液中的DC前体细胞可在体外通过细胞因子诱导获得功能性的DC.用肿瘤细胞冻融抗原冲击癌性胸腔积液来源的DC可以增加CIK细胞的体外特异性杀伤力,在一定程度上抑制了肿瘤细胞的生长.
应用Dc和CIK共同培养后作用于肺腺癌细胞spe—A1的实验研究表明,CIK—A—DC的杀伤活性最强为91．3％,明显高于单纯CIK的59．7％和DCCIK的79．8％(P值分别为0．025和0．042),提示C1K-A．DC细胞对肿瘤杀伤的特异性.而DCCIK的杀伤活性为79．8％,也高于单纯CIK对照组59.7％(P=0．034),说明DC具有明显增强CIK细胞杀瘤活性的功能.
2．3 其他系统肿瘤
用负载自体肿瘤细胞裂解物的DC疫苗联合CIK治疗晚期肾癌10例,所有患者治疗2个月后CD3+、CD4+、CD4+／CD8+和CD56+均明显提高,说明负载自体肿瘤细胞裂解物的DC疫苗联合CIK细胞治疗能提高晚期肾癌患者特异性和非特异性的细胞免疫功能.治疗过程中除了个别患者出现了•过性的轻微发热和畏寒外,无明显不良反应发生.
从乳腺癌患者淋巴结中分离和诱导培养出DC细胞后,经自身肿瘤扰原冲击后能明显提高CIK细胞对自身肿瘤细胞的杀伤活性,其机制可能是通过CD3单抗激活CIK产生第一信号,DC表面CD80、CD40等共刺激分子提供第二信号,共同促发CIK的杀伤活性.束永前等心21应用CIK细胞与DC细胞联合治疗晚期各类实体肿瘤患者40例,症状均有不同程度的改善,而无明显毒副作用.
3 DCCIK细胞研究应用前景
? CIK细胞与有溶瘤作用的病毒相结合能产生强大的协同抗肿瘤作用,可一定程度上克服靶向生物治疗中存在的递呈及定向等难题,有望成为一种更为有效的肿瘤治疗方法｡CIK细胞过继免疫疗法作为一个新的治疗手段､治疗方案和标准,尚待进一步规范和统一｡作用机制､毒副作用､应用时机､给药途径和方法等问题有待进一步探讨｡但毫无疑问,细胞过继免疫治疗与手术､化疗､放疗有机结合,合理安排将为肿瘤治疗带来新的曙光｡
最新研究显示DC细胞与CIK细胞共培养后,提高了细胞的增殖速度和杀伤活性,且使其对肿瘤细胞的杀伤作用更具特异性.而且DCCIK细胞对于血液、消化、呼吸、泌尿及生殖系统等多个系统肿瘤细胞均有杀伤作用.
目前,常规进行CIK细胞、DC细胞或DC-CIK细胞的培养技术都是首先用血细胞分离机体外循环病人4000-8000毫升外周血,提取出外周血里的单个核细胞,然后在GMP实验室进行细胞培养获得具有抗癌活性的CIK、DC或DC-CIK免疫细胞.此过程中用血细胞分离机大剂量提取肿瘤病人外周血中的单个核细胞（幼稚细胞）可能会对病人的免疫系统造成损伤,临床操作时具有较大风险,很多肿瘤病人由于身体虚弱而无法完成此过程.要想克服这一困难,唯有运用极高极严格的的细胞培养技术.让肿瘤患者获得无风险无损伤的肿瘤免疫细胞治疗成为解放军309医院国际肿瘤治疗中心所有医护人员和研发人员的责任,经过两年多几百次的实验,终于取得了重大突破,实现了DC-CIK细胞的高效率培养,培养效率比常规技术提高了百倍.现在只需要采集病人40毫升左右的外周血,就可以培养出1010个DC-CIK细胞,明显优于常规的培养方法,其效应细胞CD3+CD56+高达30%以上.DC-CIK抗癌细胞实验表明,DC-CIK细胞的杀癌细胞的杀伤活性明显高于CIK细胞,与血细胞分离机采集PBMC方法培养的DC-CIK细胞癌细胞活性相当.
我们坚信,生物免疫细胞治疗已经开辟了癌症治疗的新天地,而309医院国际肿瘤治疗中心的最新一代DC-CIK肿瘤免疫细胞治疗技术,更是让广大患者看到了康复的希望!