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基因工程中 目的基因与运载体结合的成功率

来源:学生作业帮 编辑:搜搜考试网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/06/05 12:12:31
基因工程中 目的基因与运载体结合的成功率
运载体中的标记基因是检测运载体是否进入了受体细胞,还是可以检测目的基因是否进入受体细胞?
如果是第二种情况的话,那DNA分子杂交什么的是用来干嘛的呢0 0
如果标记基因只能检测运载体是否进入受体细胞,那是不是意味着部分目的基因并没有成功地与运载体结合呢?
如果是这样,一般情况下成功结合的几率有多大?
基因工程中 目的基因与运载体结合的成功率
是这样的,一般我们用两个检测标准
第一个是标记基因,用来检测是否运载体进入到受体细胞里面.例子:运载体里面带有一个抵抗抗生素的基因.那么把所有受体细胞(比如,大肠杆菌)撒在培养皿上之后,培养皿中有抗生素,只有当运载体进入细胞之后才能抵抗抗生素,所以只有这些细胞才能存活.
再者,要选择成功加入目的基因的运载体.在上面的例子中,所有存活的细菌中不是所有都含有目的基因.这时候我们用一个选择法.典型的例子是,运载体的酶切点在其中一个lacZ基因里面,如果目的基因加入进去,那么lacZ基因就不完整,所以不能表达,反之,则能表达.我们在培养皿中放一种叫X-gal的成分,这种成分跟lacZ产生的酶反应生成蓝色的菌落.所以如果目的基因没有加入到运载体里面,那么产生的菌落是蓝色的;反之,如果目的基因加入进去,lacZ基因无法表达,X-gal无法分解,所以菌落就是白色的
这样,就可以选择想要的目的基因了
这个成功结合率没有固定的,要因实验而定