大家好,我现在做细胞实验开始需要构建目的基因的过表达,不知道应该选用慢病毒载体还是腺病毒载体,标书

来源：学生作业帮编辑：搜搜考试网作业帮分类：综合作业时间：2024/05/16 08:48:44

原代培养,不分裂,或者生长缓慢的细胞,一般用慢病毒
生长迅速的细胞系可用腺病毒（表达比较快)
再问：我的细胞是小鼠心肌细胞株，非原代，3天左右传一次带，应该怎么选择呢？
再答：慢病毒比较好
再问：可是有些资料说基因的过表达优选腺病毒，而慢病毒则优选于RNAi和过表达microRNA，怎么理解啊？
再答：我2个都用过。腺病毒制作比较方便，安全性高。目标基因报道快（数小时）。但是生长慢的细胞效果不理想。慢病毒主要的优点就是可以稳定整合到基因组，可以长时间表达（所以RNAi都用），但是要好几天才行。
再问：恩，非常感谢您的帮助！那我还想知道，因为我要做过表达的话肯定要表达丰度高的好啊，那个如果用慢病毒的话怎么能够保证它的表达丰度呢，而且慢病毒不能扩增，如果在传代过程中目的基因的表达衰减了怎么办呢？另外我想知道的就是有没有什么办法可以缩短细胞的传代周期呢？谢谢！QQQ~~~
再答：你正好弄反了，慢病毒整合到基因组后。可以随细胞分裂而扩增。腺病毒由于人工去掉了扩增区，所以无法扩增。随细胞分裂而被稀释。表达丰度取决于promoter。建议不要尝试缩短细胞的传代周期，这样得出的结果就不适用于原来的细胞系了

大家好,我现在做细胞实验开始需要构建目的基因的过表达,不知道应该选用慢病毒载体还是腺病毒载体,标书基因工程中的逆转录病毒做载体时,逆转录病毒是RNA病毒,如何与目的基因结合?构建表达载体? 我有一段目的基因,需要构建表达载体,此时是扩增目的基因的全长还是? 有别人构建好的含有目的基因的表达载体质粒,但是只知道目的基因的mRNA序列,如何做PCR检测目的基因? 构建腺病毒载体时目的基因要和gfp融合么,有点小纠结,融合的话会不会影响我的目的蛋白基因表达载体的构建与将目的基因导入受体细胞的区别? 腺相关病毒载体携带目的基因转染细胞,目的基因整合到宿主细胞DNA上,为什么可以持续表达? 基因表达载体的构建请问适合用于构建动物细胞表达载体的是：质粒、λ噬菌体衍生物、植物病毒、动物病毒将目的基因导入动物细胞用到的载体只能是病毒吗?质粒可以吗? 关于PCR产物酶切要构建一个载体目的基因PCR回收后做双酶切应该做多大的体系50 or 100?各种成分为多少?望大家不可以用构建好的插入了目的基因的表达载体重组质粒做southern吗