如果是载体是环形基因,PCR扩充目的基因时,限制酶的切法

如果是载体是环形基因,PCR扩充目的基因时,限制酶的切法 标记基因和目的基因是连在一起的吗?如何用标记基因筛选目的基因载体? 用同种限制酶切质粒和含有目的基因的DNA,用DNA连接酶连接后为什么不会出现载体-目的基因连接物这种产物? 如何验证载体质粒的酶切位点已被切开?PCR产物（目的基因）被酶切开? PCR技术是获取目的基因的方法还是扩增目的基因的方法 PCR引物是目的基因中的一段么,还是和目的基因中的某段是互补的? 为什么“利用PCR技术扩增目的基因”是获取目的基因的步骤?（ PCR技术为什么是获取目的基因的途径 PCR扩增技术获取目的基因的原理是? 怎样理解PCR技术是获取目的基因的途径? 限制行内切酶切割质粒和目的基因后,目的基因是怎么和质粒连接的? 为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急