为什么HAT培养基可以把杂交瘤细胞选择出来

来源：学生作业帮编辑：搜搜考试网作业帮分类：生物作业时间：2024/06/08 18:48:25

单克隆抗体技术中人工诱导小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞融合后,细胞将以多种形式出现,如脾细胞-瘤细胞、脾细胞-脾细胞、瘤细胞-瘤细胞、细胞多聚体、未融合的脾细胞和瘤细胞等,其中只有脾细胞-瘤细胞的融合体是有用的.正常的脾细胞在培养基中存活仅5-7天,无需特别筛选,细胞多聚体也容易死去,关键问题是要去除未融合的瘤细胞.选择培养基具有3种关键成分：次黄嘌呤（hypoxanthine）、氨甲蝶呤（aminopterin）和胸腺嘧啶核苷（thymidine）,故名HAT培养基.这个培养基通过抑制瘤细胞的核苷酸合成,达到去除未融合瘤细胞的目的.细胞有两条基本途径合成嘌呤核苷酸,一条是从磷酸核糖、氨基酸、CO2和NH3等化合物开始,叶酸是重要的辅酶,而氨甲蝶呤是叶酸的拮抗剂,可阻断瘤细胞通过这一途径合成核苷酸.另一条途径是利用已存在的碱基,经特异的磷酸核糖转移酶催化合成核苷酸,如次黄嘌呤经过次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT）转变为嘌呤核苷酸.融合所用的瘤细胞是选择出来的HGPRT缺陷细胞株,因此不能在HAT培养基中生长,而且不合成或不分泌免疫球蛋白.只有融合细胞具有亲代双方的遗传性能,可在HAT培养基中长期存活与繁殖并分泌抗体.杂交瘤细胞选择成功后,还需要将细胞稀释为单个培养,用ELISA法鉴定和选择高分泌特异抗体的杂交瘤克隆.

为什么HAT培养基可以把杂交瘤细胞选择出来高中生物,经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆抗体的生产,这句话错吗?果胶酶可以分解什么?可以分解纤维素吗? 在HAT培养基筛选出的杂交瘤细胞,是产生多种抗体吗?筛选的依据是什么? 为什么制备单克隆抗体时要用已免疫的B淋巴细胞为什么用选择培养基选出杂交瘤细胞后还要进行抗体阳性检测在选择培养机上培养后就是杂交瘤细胞为什么还要进行专一抗体检验? HAT培养基筛选融合细胞的基本原理为什么把培养基注射到小鼠腹腔里面就可以洗出细胞来啊? 杂交瘤细胞筛选完,成单一杂交瘤细胞后,为什么还要进行抗体阳性检测? 单倍体克隆技术中筛选出杂交瘤细胞后,为什么要对杂交瘤细胞进行克隆繁殖? 单克隆抗体中得到了杂交瘤细胞后为什么还要进行杂交瘤细胞的筛选? HAT培养基是什么培养基? 杂交瘤细胞的体外培养与植物组织培养的培养基相比有何主要不同