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血清总蛋白测定 双缩脲比色法的原理 有谁知道?

来源:学生作业帮 编辑:搜搜考试网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/06/03 20:16:20
血清总蛋白测定 双缩脲比色法的原理 有谁知道?
血清总蛋白测定 双缩脲比色法的原理 有谁知道?
大鼠血清总蛋白含量测定(双缩脲比色法)
一.原理
蛋白质是由许多氨基酸通过肽键相互结合而成.肽键在碱性溶液中能与铜离子作用产生紫红色络合物.测定紫红色络合物的吸光度,能计算总蛋白的含量.
二.目的
1.掌握血清总蛋白含量的测定方法.
2.观察阴虚大鼠模型血清总蛋白含量的变化.
3.观察中药对阴虚大鼠模型血清总蛋白含量的变化.
三.试剂
1.总蛋白试剂
硫酸铜0.12 mmol/L
酒石酸钾钠21.1 mmol/L
氢氧化钠0.75 mmol/L
2.蛋白标准液:血清白蛋白50g/L
四.材料
1.试管(100*16mm)3支
2.移液器(P20ul、P200ul、P1000ul)各1把
3.石英比色皿(1ml)4只
五.测定方法
单位:ul
空白管(b)
标准管(std)
测定管(s)
H2O
蛋白标准液(50.0g/L)
样品
总蛋白试剂
10.5


1050

10.5

1050


10.5
1050
混匀,室温放置30分钟,以空白管校零,测定550nm处的吸光度.
六.计算
总蛋白含量(g/L)=(测定管吸光度/标准管吸光度)×标准液浓度
七.注意事项
1.室温放置30分钟后必须立即测定吸光度,否则吸光度会增加.
2.实验试剂用量较少,所以加量一定要仔细、准确.