pcr反应的引物必须是目的基因的一段么
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/06 07:29:17
如果实验目的只是基因型鉴定,对PCR产物无其他要求的话,二聚体并非不能忍受,可以尝试以下方法优化反应条件:1.确定DNA模板为阳性,即确定含有目标序列;2.对退火温度设置温度梯度,琼脂糖电泳检测是否有
正向引物:5'CTTCGAAATTC反向引物:5'CCGATCGGGAGA(TCTCCCGATCGG的反向互补序列)当然,这对引物有些短,其实真正设计时上下游引物的序列中都可包含部分基因1的序列,以平
你的realtimePCR扩增的是cDNA啊,因此用CDS序列啊.
在PCR技术中,需要有两种分别与两条DNA链互补的RNA引物,不是DNA链,而且一般都是两种.再问:与DNA互补为什么是RNA引物呢?是因为一种引物只能只能向一个方向延伸吗?再答:其实,DNA引物也可
你这是mRNA序列还是cDNA序列啊?你目的是什么?引物你设计在什么位置,你还是说清楚点吧!再问:要做的是基因的表达,这个基因是从NCBI上直接查询得到的。http://www.ncbi.nlm.ni
前提表述有误,因为DNA复制需要RNA引物,所以PCR才需要人工引入引物.但是该引物绝对不会在目的基因中,它是一段与DNA互补的RNA链,而且与目的基因之外的两端互补.要是与目的基因中的序列互补,PC
你看,你分别获得了1-1200nt以及1000-1400nt这两段序列,那么中间有200bp长度的序列是重叠的,对吧?也就是说你已经从序列信息上获得了这个CD区所有的序列信息.如果你只是需要序列信息的
扩增条带以后,有的可以分离出来,经过纯化后就可以获得目的基因~
这个和PCR扩增所用的酶有关,这个酶叫TAQ酶,他不能直接与母链DNA结合,这能和引物先结合,在进行复制.引物是一段特定的RNA,与母链互补的系列结合后,TAQ酶在与引物结合,开始复制
引物本来就是单链的.书上画成双链才怪.PCR所用的DNA聚合酶只能顺着已经存在的一小段DNA的尾巴来接着合成,它不会自己起头.引物就是这么一小段用来起头的DNA.DNA本身很长很长,我们扩增时,只能扩
引物的功能是作为核苷酸聚合的起始点,引导DNA的合成.能设定循环次数,及控制复制次数.PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度.一般的循环次数选在30~40次之间,循环次数越多,非特异性产物的量亦随之
请问你试过几对引物?用过多少种酶跟退火温度还有延伸温度,pcr扩增的体系是要你慢慢摸索的试试用Extaq高保真的酶扩增如果在基因组上扩增建议你退火温度从55°开始扩,逐渐降低温度再问:引物大概有4对了
问师姐最方便.不然把引物序列拿出来,去跑个BLAST,看中间那段gene.不然你做好PCR之后跑个胶嘛,看看大小就行了.
首先,上下游引物20多个bp,4种碱基,想在基因组上找到2个一样的排列的情况是几乎不可能的事.所以,你只要确定了上下游引物,那么得到的就一定是你要的基因.其次,能问这个问题,说明lz对pcr的原理貌似
不是再答:对拓扑异构、长度、碱基比例排列、端处有要求。
PCR的目的是为了扩增目的基因小一点的基因可以直接合成但是大一点的基因就得用PCR扩增了引物是和目的基因的一端互补的单链DNADNN左边一个序列右边一个序列而且DNA的复制只能按照一个方向复制就是由3
模板大多数为一条,也可为多条,引物至少两个(三五处复制)启动与终止各一个为模板上公用.
那是显然的,所以在提rna做pcr的时候,如果里面混了基因组dna,那就有可能导致假阳性再问:谢谢,但是这不是我想要的答案。请问做半定量RT-PCR的引物怎么设计?可以设计在基因的非翻译区,然后扩非翻
首先,我们来说一下PCR技术所用的酶.所用的酶是TaqDNA聚合酶,现在已知的所有的DNA聚合酶在使单个的脱氧核苷酸聚合的时候都有一个共性,它无法从头开始,只能在一段序列的末尾续接.在生物体内DNA自
PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物.PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间