PCR产物直接测序 需要提供什么

按理来说是不影响的,因为loadingbuffer里面主要是染料和比水重的成分,这样方便跑胶.你要是不放心的话就把产物都跑胶了,然后利用胶回收试剂盒来做.

博凌科为生物科技-为你做多重的时候需要你建立单重pcr后再进行多重pcr的条件优化,根据电泳条带决定加减个因素的用量；用特异性引物扩增不出条带是因为样品DNA中没有特异性引物所对应的基因吧.

首先你要有你目的产物和测序的DNA序列在网页最下端第二行有AligntwosequencesusingBLAST(bl2seq),点击进入看到有Sequence1和Sequence2,这里面分别输入你

这个是可以的,只是效率不高

使用标准浓度内参.

1.先看下PCR电泳图里杂带多不多,若有的话很可能非特异性扩增了2.若条带干净,仍然有可能存在非特异性扩增,引物特异性不高导致竞争结合可将DNA直接酶切看是否能切出你的目标片段3.序列比对结果不能只看

当然可以的.

你的序列AT含量很高,测序结果不好,所以我怀疑是你的片段里有polyA或者是polyT,一般超过7个以上的都会引起后续的测序乱峰,你的乱峰前边如果是一连串的A或者T的话,那就是这个原因,想要测好得靠运

北京三博远志16srdna测序/鉴定说明：1、样品形式可以是新鲜菌液、斜面培养基、平面培养基或者提取好的DNA.2、如果样品为基因组DNA,DNA浓度>20ng/ul,体积大于20ul.3、鉴定结果一

外部的核酸污染造成的非特异性扩增是PCR准确性所面临的最大问题所以一定要注意避免体系污染

能说一下你这样酶切的目的么?40bp和36bp的条带,只相差4个bp,基本上在琼脂糖胶上就不用考虑分清楚了.最好使用聚丙烯酰胺凝胶,很多用变性聚丙烯酰胺凝胶,可以分离到碱基数相差很少的条带,而某些变性

恩,原始的方法是PCR产物与变性缓冲液混合,95或98度变性5到10分钟.变性缓冲液中含有甲酰胺,是一种变性剂.后来出现了核酸外切酶,PCR产物酶切成单链再跑,变性不变性效果可能一样的,不过酶有点贵.

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和缓冲液（其中需要二价Mg离子).

原理：是来至于双脱氧链终止法——现在应用最多的核酸测序技术,由Sanger等1977年提出：模板经过测序PCR反应后形成3'末端带有荧光标记（早期用同位素标记）的相差一个碱基的不同长度的产物,再根据每

你让公司测通不然最多只能测1000左右的序列而且只有不到800的测序是靠谱的后面的都不靠谱再问：测出1000bp，前面20bp左右序列不太一样，后面都是一样的，还有测通是什么意思，全部的序列都能测出吗

众所周知,PCR圹增过程中会出现很多错配现象,但不可能所有的错配都发生在同一位置.PCR片段直接测序时,其结果是PCR片段众多分子的混合物的结果.如果在某一个点上出现了几十次错配现象,但大多数分子（或

PCR产物测序的最大风险是有在凝胶上看起来的一个条带,实际上有多个分子.也就是说长度相似的分子有可能在电泳的时候只有一条带.如果只是进行PCR产物回收,没有进行凝胶分离的过程的话,东西可能更多了.问题

楼上说的是一方面.PCR产物测序也是可以的,可以送粗样,也就是不纯化的,也可以送纯化好的.但很多公司测的不是很好,所以一般建议转到克隆载体中保存了送菌液或质粒测序.PCR产物纯化是去除多余的dNTP和

在260nm下测定其吸光值.注意,这是紫外.计算：DNA的质量浓度（mg/L）=50×A260nm原理：核酸分子中的嘌呤碱和嘧啶碱由于碱基共轭双键的作用,具有强烈的紫外吸收,最大吸收值在260nm处.

你需要保存多久?我最多放过两三天,没问题再问：我周三晚上扩增出来的，结果给忘记放冰箱了，刚刚才放进去，后边要做DGGE，还可以用么？再答：不好意思DGGE实验我没有操作过。但是从理论上来说，2天不会降