光密度比内参照基因条带的光密度-搜答案-搜搜考试网

我也遇到过这种问题,个人觉得可能是目的基因的定量引物不好,还有就是要优化PCR条件!

如果实验目的只是基因型鉴定,对PCR产物无其他要求的话,二聚体并非不能忍受,可以尝试以下方法优化反应条件：1.确定DNA模板为阳性,即确定含有目标序列；2.对退火温度设置温度梯度,琼脂糖电泳检测是否有

当然不一定,比如说你的目的基因的copynumber高或者PCR的效率高都会使得beta-actin的条带不如目的基因的条带亮

上下引物的Tm最好相似,不能差异太大,不然不好设计退火温度；内参条带很亮,说明RT应该没多大问题,问题可能出现在PCR上.没有目的基因是因为1该基因确实不表达；2你的引物不特意,到NCBI的Prime

在这个专利文件里面有全长,引物你自己设计吧

就是你那样做的.亮的就稀释模板,上样量当然要保持

这个要看你在做PCR前的加样量是否一致.如果加样量是一致的,而内参做出来差别大（比如3-4个CT值）那说明你的实验体系有严重的问题.理论上加入的DNA量一样多,内参的CT值应该都一样.如果你能肯定加样

水170水泥283砂584石子1363,混凝土搅拌站一般不用,砂率太小!

其实这个波长也不是绝对的,我们也有用过460nm,600nm等.一般来说测量光密度是用来测量浊度,通过浊度来表示菌的浓度.那么这个波长可以选择和菌液比较相似的颜色,这就和培养基、菌本身的颜色等等都有关

提交不了答案.不要调一致把内参也检测了

为啥要把内参调一致呢你每次都也检测一下内参不就好了然后用目的基因的比上内参一般很少有什么调一致的吧.

1、内参没有被扩增出来2、电泳时内参没加loadingbuffer或染料

好的内参基因应该受环境影响变化较小,否则不能作为对照与处理的内参.常用内参有actin,ubiquitin,histone等等,一般物种都有常用内参,不建议在这方面发挥.再问：看的文章里筛内参基因时怎

内参就是对照基因,在PCR中,就是肯定能用PCR扩增出来的基因,无论你要扩增什么生物,比如你做的是真菌,都可以扩的出来.阳性对照的目的,有两个：一个是帮助你判断你的PCR扩增的过程中有没有出现什么问题

WesternBlot原理Western免疫印迹（WesternBlot）是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测.对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的

光密度即光吸收值,也叫吸光度指的某一物质或溶液对光的吸收程度,浓度越高,则对光的吸收越多,吸光度越大,在一定范围内吸光度和浓度成正比,常用于测量浓度DMF的全名是N,N-二甲基甲酰氨,是一种高极性溶剂

这样子调内参基因的条带似乎是不严谨的．理论上来说,如果你用相同总量的cDNA或DNA模板,并用相同的内参基因引物对,相同实验条件和循环次数,你应该得到相同的内参基因条带,这才能证明你的每次实验操作是可

1.protein-blot之前用Bradford测一下总蛋白量,估摸一下2.做完第一次后,用photoshop软件测一下各个内参条带的光密度值,这样可以给第二次调整的时候一个参考.

我不了解你的实际情况,我给你几条建议：1.可能是内参引物有问题2.你扩增内参基因的PCR条件设计可能有问题,如Tm3.你用的是一块胶吗?加核酸染料了吗?

一个一个查的：Oryzasativasspjaponicacv.Nipponbareactin：LOC_Os03g61970Oryzasativasspjaponicacv.Nipponbarealp