做western样品处理问题

来源：学生作业帮编辑：搜搜考试网作业帮分类：语文作业时间：2024/06/04 18:49:20

做western样品处理问题
如果我要把单抗转到NC膜上进行一抗二抗反应,那应该怎么处理,上电泳前一煮不就失活了吗,请说明一下理由
比如我要测一个单抗，把它转膜上，然后加抗原，再加二抗，这样可行吗，那转膜上的单抗怎么处理，
如果是细胞表面分泌的蛋白呢，

转膜并不是把单抗转上去,而是把总蛋白给转到膜上,便于后面一抗二抗反应.电泳前煮蛋白样品是让蛋白变性,由空间折叠构象变成线性的结构,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳后,能按照分子量大小依次排开.抗原抗体反应并不需要有活性的蛋白.
你的单抗仍然是蛋白,其实仍然是蛋白印迹,是需要变性的.试问假如按照你的思路,抗原根本是多余的了,你直接用二抗结合一抗不就行了吗?然后二抗上带有酶,再进行显色反应.

做western,彩色的marker跑的胶上了,考马斯亮蓝没染出样品的蛋白条带.是样品的问题还是胶有问题? 样品收费的可与成品做相同处理. 做western处理蛋白时煮过头了会蛋白降解吗? iptg诱导完的大肠杆菌想做western blot 该如何处理菌体? western blot显影问题石墨炉原子吸收光谱法处理样品时要注意哪些问题? 用western blot做磷酸化蛋白的测定需要注意哪些问题请问做Western blot非要测样品的浓度吗一般用什么方法测蛋白加样缓冲液的作用是什么 Western 原子吸收光谱仪实验样品如何处理? western blot条带问题,高手请进一块半导体样品的问题.