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革兰氏染色实验的具体操作是怎样的?

来源:学生作业帮 编辑:搜搜考试网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/10 07:18:00
革兰氏染色实验的具体操作是怎样的?
革兰氏染色实验的具体操作是怎样的?
1.火焰外焰固定细菌的涂片;
2.初染:加饱和结晶紫染色1min;水洗;
3.媒染:加卢戈氏碘液染色1min;水洗;
4.脱色:加95%酒精脱色30sec(或至无紫色脱下)水洗;
5.复染:加稀释石碳酸复红染色30-60sec,水洗后晾干玻片,镜检.
再问: 具体的
再答: 我的天,这还不具体?你还要什么? 1。 涂片:左手持菌液试管,右手持接种环,用接种环从试管培养液中取一环菌,于载玻片中央涂成薄层(事先在背面做好标记圆圈)即可,或先滴一小滴无菌水于载玻片中央,用接种环从斜面上挑出少许,与载玻片上的水滴混合均匀,涂成一薄层。   拔或塞试管塞时,应将试管口通过火焰略加烧灼,最后将接种环在火焰上烧灼灭菌。    2。 干燥:涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥,但勿靠近火焰。    3。 固定:常用高温进行固定。即手持载玻片一端,标本面朝上,在灯的火焰外侧快速来回移动3~4次,共约3~4秒。要求玻片温度不超过60℃,以玻片背面触及手背皮肤不觉过烫为宜,放置待冷后染色。    4. 染色:    (1)初染: 加饱和结晶紫一滴,约一分钟,水洗。   (2)媒染: 滴加卢戈氏碘液冲去残水,并覆盖约一分钟,水洗。    (3)脱色: 将载玻片上的水甩净,并衬以白背景,用95%酒精滴洗至流出酒精刚刚不出现紫色时为止,约20—30秒,立即用水冲净酒精。    (4)复染: 用稀释石碳酸复红液染0.5-1分钟,水洗。    5. 镜检:干燥后,置油镜观察。革兰氏阴性菌呈红色,革兰氏阳性菌呈紫色。以分散开的细菌的革兰氏染色反应为准,过于密集的细菌,常常呈假阳性。