目前一般的PCR产物大小是多少呢,是不是上1.5kb的序列就不好P出来了呢

来源：学生作业帮编辑：搜搜考试网作业帮分类：综合作业时间：2024/06/04 17:29:14

目前一般的PCR产物大小是多少呢,是不是上1.5kb的序列就不好P出来了呢
我的5'端重复序列相当多，设计得到的PCR产物因该是1.5Kb左右，但是跑胶验证的才750bp 各位大侠帮我出出主意，咋能得到比较完整的序列

如果重复序列比较多,还是请选择再延长一点5’段,避免引物错配.
一般的PCR体系用来扩增800bp以内的片段效果还可以,上了1000bp,我们都推荐使用LATaq酶,或者其他长片段酶,并延长退火时间,保证长片段可以完整复制.
请你查查你的序列,看看750bp处是否有容易与引物错配的序列,如果没有,延长退火时间、降低退火温度试试；如果有,降低退火温度或者从新设计引物吧.

为什么pcr的重复性会这么不好呢,难道是PCR仪有问题就目前一般测量员的工资是多少? 不同种类PCR各需要什么样的PCR仪呢?哪些种类用普通的PCR仪就可以呢? 月球到底是不是从地球上分割出来的呢? 转录组测序得到的序列,想把一个基因克隆出来,但是不知道序列是不是完整,怎么确定是否完整呢从NCBI上查找到的一个目的基因做PCR,设计引物时PCR产物长度是这个基因的全部序列吗? 做荧光定量PCR,但是不知道内参的序列,如果NCBI上没有该怎么设计内参的引物呢? 第六次人口普查结果出来没有?中国目前的人口总数是多少呢? ncbi上的基因序列是编码链还是模板链呢?如果通过基因名选择,出来是一个反向的序列,对引物设计有无影响? PCR的扩增产物是什么是如何扩增出来的怎样通过已知基因序列和引物序列测算PCR产物大小要上高中了,物理是不是很难呢?该怎样适应高中的物理呢?真的好怕学不好物理.