如何给一段序列增加一个酶切位点.

来源：学生作业帮编辑：搜搜考试网作业帮分类：生物作业时间：2024/06/26 04:22:23

如何给一段序列增加一个酶切位点.
做SNP的,酶切的方法简单快捷,但是选择基因的位点没有酶切位点,想请问大家如何给一段序列增加一个酶切位点?具体的实验步骤和所用仪器设备.
PCR的过程就不用说了,我想问问引物如何能引入酶切位点啊?

你可以设计带有酶切位点的引物,对目的基因进行PCR,就可在目的基因上引入酶切位点.
步骤：引物设计（借助软件）——合成引物（公司合成）——PCR.
最重要的一个仪器就是PCR仪了,具体的加什么试剂,加多少,我想楼主应该是做分子生物学,这些应该挺清楚的了.
楼主,引物一般是用软件设计,例如Primer.5,你根据你的目的基因两端的特点,设计合适的引物,然后在引物上再添加酶切位点 ,例如EcoRⅠ 是应用最广泛的限制性内切酶,酶切位点和切割位点如下：5' G↓AATTC 3' 3' CTTAA↑G 5' ,你就可以在这两条引物上分别添加这几个脱氧核苷酸,这不就在引物中引入酶切位点了吗?经过PCR后引物和目的基因连在一起,酶切位点自然也连上去了.楼主,你可以根据需要,引入不同的限制性内切酶的酶切位点.

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