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PCR产物跑电泳为什么跑不出孔,

来源:学生作业帮 编辑:搜搜考试网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/15 02:09:42
PCR产物跑电泳为什么跑不出孔,
PCR产物跑电泳为什么跑不出孔,
检查一下电泳仪、电泳缓冲液有没问题
再问: 电泳液没有问题,刚刚用同学的PCR产物跑了一下,她的跑出来了,我今天上午又重新做的PCR,下午跑电泳一部分跑出来了,另一部分还在孔里面,不知道问题出在哪里,我是用第一次PCR的产物做的第二次PCR的模板
再答: 能问一下你说的“一部分还在孔里面”是指什么?指这一道没有任何条带呢,还是跑完电泳之后发现上样缓冲液里的指示剂(溴酚蓝之类的)还在孔里面? 如果跑完样,肉眼看有蓝色条带,说明电泳仪、电泳缓冲液没问题,可能是你PCR没有扩增出条带;如果是蓝色条带还在孔里,那可能是硬件有问题。 你后来说其它同学的PCR产物能跑出来,我觉得可能是你自己的PCR没扩增出来。
再问: 缓冲液跑出来了,就是在紫外灯下显示的荧光还在凝胶孔里
再答: 跑出来了应该仪器没问题 DNA还在孔里说明可能是堵住了 但是PCR产物怎么会堵住呢?又不是提取的DNA,可能含有蛋白什么的。该不会是你PCR的模板不怎么纯吧……? 你用的凝胶浓度多少?DNA片段又是大概多长呢?如果片段比较大,要不降低凝胶浓度试试?
再问: 百分之一的凝胶,2400的片段,难道是pcr产物不纯,我是用CDNA扩的长片段,然后用长片段扩的短片段,CNDA是我自己提取的,能留下联系方式吗,我的QQ541769997