酶切位点怎么选择?将突变片段连接到质粒上

来源：学生作业帮编辑：搜搜考试网作业帮分类：生物作业时间：2024/06/14 08:21:32

酶切位点怎么选择?
将突变片段连接到质粒上

酶切位点的距离太小（小于10bp）,影响限制性内切酶对切点的识别,不利于空载体的双酶切（会切不开哟!）
（1）一般目的基因用于克隆表达的情况下,酶切位点的选择要考虑到：
目的基因片段内部不含有所选的酶切位点（不然鉴定阳性重组子双酶切时会将目的基因切断）
（2）实验后继应用的所有载体(真核、原核、酵母、昆虫)都尽可能含有所选的酶切位点．并且要保证在载体上的插入方向正确（定向克隆）.（不然换载体表达时,还要重新设计引物,以引进新的酶切位点）
（3）尽可能选比较常用的酶切位点.（常用切点酶的价格比较便宜）

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