目的基因连入表达载体后用不用先转入DH5a扩增、酶切鉴定然后再转入BL21?

来源：学生作业帮编辑：搜搜考试网作业帮分类：综合作业时间：2024/06/06 02:41:53

最好先转入DH5-alpha扩增,这样可以提高目的基因的数量与纯度,经酶切确认后,可获得足够多的DNA转入BL21.当然,如果你对你的目的基因有自信（如用PCR从另外的质粒上扩增而来,且条带清洗专一）,也可以直接转入BL21做表达,这样可以节约大约1.5-2天的时间.另外帮你找了一下,我们实验室现在没有细胞的protocol.

能不能用PCR直接扩增目的片段,然后转入表达载体,代替在克隆载体或dh5a中的扩增目的片段转入表达载体后我用什么方法可以检测我的目的质粒? 用EcorI和SalI酶切目的基因和载体后酶连,然后转化DH5a,涂板后却不长菌,是为什么呢? 为什么目的基因转入后不会影响其他基因的表达目的基因怎样转入微生物动物的生长激素基因转入植物后能否表达动物的生长激素基因转入植物后可以表达吗? PCR扩增出目的片段之后为什么要酶切?酶切下来的是目的片段和载体?然后再把它们连起来?很困惑. 用同种限制酶切质粒和含有目的基因的DNA,用DNA连接酶连接后为什么不会出现载体-目的基因连接物这种产物? 为什么动物基因转入植物可表达? 进行PCR扩增时为什么要将目的基因连到载体上?直接对其进行扩增不行吗? 转基因作物被动物食用后目的基因会转入动物体细胞内?