ncbi fasta 引物设计问题

如何用ncbi设计引物以及验证引物 简并引物 设计软件有Fasta格式的比对文件想设计简并引物该用什么软件? 带酶切位点的引物设计问题 如何在ncbi中下载gi和FASTA ? 麻烦用ncbi设计一对PCR引物,不会用那个程序 实时定量PCR 引物设计的问题, 荧光定量PCR引物设计的问题 PCR引物设计应该注意的问题? 关于real time PCR 引物设计的问题 引物设计问题,以mRNA序列设计引物,然后用cDNA为模板来扩增,在设计引物时mRNA序列是否要反转序列? 从NCBI上查找到的一个目的基因做PCR,设计引物时PCR产物长度是这个基因的全部序列吗? 做荧光定量PCR,但是不知道内参的序列,如果NCBI上没有该怎么设计内参的引物呢?