western及pcr中关于内参和marker的问题,期待您的解答

来源：学生作业帮编辑：搜搜考试网作业帮分类：生物作业时间：2024/06/09 07:52:07

western及pcr中关于内参和marker的问题,期待您的解答
刚刚接触这些技术,在western和pcr中内参和marker都必须加么?内参是什么时候加,和样品一起加入上样孔么?内参可以不用么,这样最后比较表达多少的时候实验组的都以对照组为标准来比较行么?pcr产物检测的时候只有marker是不是就行,不用内参?另外还有一个疑问,免疫组化和western都是用来测蛋白,有必要对同一种蛋白两种方法都做么?

首先要明白,marker和内参不是一种东西.Marker是用来标定蛋白或者DNA大小的.内参对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白,它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物.其作用是校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差,保证实验结果的准确性.
pcr产物检测一般marker就可以了.不用内参.
western一般全都要用.
免疫组化检测蛋白偏重于蛋白在细胞及组织中的表达分布,定量较为不精确.所以要根据你实验的目的选择实验方法.

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