高效液相出现双峰重叠对照品是腺嘌呤和枸橼酸,供试品为CPDA1昨天流动相缓冲液是磷酸缓冲液,用的是磷酸氢二钠4.5g,磷

来源：学生作业帮编辑：搜搜考试网作业帮分类：化学作业时间：2024/06/06 11:18:16

高效液相出现双峰重叠
对照品是腺嘌呤和枸橼酸,供试品为CPDA1
昨天流动相缓冲液是磷酸缓冲液,用的是磷酸氢二钠4.5g,磷酸二氢钠1.6g,二硫酸四丁基胺0.3g,+900ML注射用水用磷酸调PH到2.5（PH计确认无误）,加水至1000ML,和HPLC级甲醇15:85混得流动相.
今天也是同样配了2000ML.先使用昨天配的流动相稀释和平衡柱子（排除清洗操作和稀释的浓度问题）
昨天使用时出峰很正常但是下峰收尾略拖长,但是今天出现双峰重叠现象,起初伴有平头峰,量程问题已经解决,但腺嘌呤和总枸橼酸依然重叠,枸橼酸对照品提前出峰（时间和腺嘌呤相近）,是否是流动相问题,但是若是流动相问题昨天做液相出图很正常,分离的很好,还是缓冲液冰箱里放过夜失灵?
发现柱压下降，现试图反冲柱子，不知道有么有效果

重配流动相吧,柱压下降为什么要反冲柱子?柱压偏高才反冲的.分析测试百科网乐意为你解答实验中碰到的各种问题,基本问题都能得到解答,有问题可找我,百度上搜下就有.
可能是色谱柱污染了,用的是C18柱的话,用水和乙腈多清洗一下,离子对流动相对色谱柱的损伤都比较明显,尽量缩短检测时间,做完后立即清洗色谱柱.
流动相还是现配现用的好,反冲柱子一般是在柱子有污染的时候或是柱压偏高时再生时常用到.反冲不是反用
重新配流动相冲一下,你柱子用多长时间了,可能是柱子不行了,换保护柱试一下!反冲对柱子损害太大的
磷酸盐作流动相时做完样一定要用水冲洗干净,磷酸盐要现用现配而且建议用0.2微米的滤膜进行过抽滤
柱压降低,不是盐析出,应该不需要反冲,应该是有残留,用水-乙腈多冲洗下

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