我要做基因的真核表达,用的酶是将XhoI 和EcoRI联用,怎么看酶切之后会不会发生移码问题呢?请多多指教!
来源:学生作业帮 编辑:搜搜考试网作业帮 分类:语文作业 时间:2024/05/15 00:53:16
我要做基因的真核表达,用的酶是将XhoI 和EcoRI联用,怎么看酶切之后会不会发生移码问题呢?请多多指教!
这是我用的真核表达质粒载体
还有就是,我的那个目的基因有自己的启动密码子和终止密码子,而载体质粒也有启动密码子和终止子,那我设计引物的时候是不是要把目的基因的终止子去掉呢?
这是我用的真核表达质粒载体
还有就是,我的那个目的基因有自己的启动密码子和终止密码子,而载体质粒也有启动密码子和终止子,那我设计引物的时候是不是要把目的基因的终止子去掉呢?
如果是目的基因里面没有XhoI 和EcoRI的酶切位点,引物设计好了,应该不会出现移码的问题.
再问: 可是我们老师告诉我说酶切之后,如果碱基不是3的倍数的话,就会发生移码,我就是不明白这数碱基是数质粒的,还是数我的目的基因呢?
再答: 数重组的质粒,插进去的目的基因序列转录出的mRNA的起始密码和终止密码应该是没问题的,看连完之后有没有移码问题。
再问: 请问是将目的基因克隆到载体之后,从目的基因的起始密码子数到载体的起始密码子吗?如果是3的倍数就不会发生移码了呀?
再问: 可是我们老师告诉我说酶切之后,如果碱基不是3的倍数的话,就会发生移码,我就是不明白这数碱基是数质粒的,还是数我的目的基因呢?
再答: 数重组的质粒,插进去的目的基因序列转录出的mRNA的起始密码和终止密码应该是没问题的,看连完之后有没有移码问题。
再问: 请问是将目的基因克隆到载体之后,从目的基因的起始密码子数到载体的起始密码子吗?如果是3的倍数就不会发生移码了呀?
请说明在原核细胞中表达真核基因,合成真核蛋白存在的主要问题.
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