关于菌落pcr我的做法是: 用枪头挑选单菌落到装有10uL水的pcr管中,然后悬浮菌液. 在做 PCR 时,吸取 2uL
来源:学生作业帮 编辑:搜搜考试网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/04/30 04:20:00
关于菌落pcr
我的做法是: 用枪头挑选单菌落到装有10uL水的pcr管中,然后悬浮菌液.
在做 PCR 时,吸取 2uL 做摸板,但电泳检测后,选有阳性克隆相对的菌液 8uL 与试管的液体培养基中培养.这样做, 既初步检测了阳性克隆,又保存了所需要的菌落.
但做了几次都没P出条带.
还有人说这个结果不可信,要提质粒酶切.能不能解释一下.
哪些情况假阳性.
还有实验需要注意的.
新手请教~
我的做法是: 用枪头挑选单菌落到装有10uL水的pcr管中,然后悬浮菌液.
在做 PCR 时,吸取 2uL 做摸板,但电泳检测后,选有阳性克隆相对的菌液 8uL 与试管的液体培养基中培养.这样做, 既初步检测了阳性克隆,又保存了所需要的菌落.
但做了几次都没P出条带.
还有人说这个结果不可信,要提质粒酶切.能不能解释一下.
哪些情况假阳性.
还有实验需要注意的.
新手请教~
主要是不能带入AGAROSE,它是抑制PCR反应的.所以不要担心没挑到,反而更应注意别挑太多量进去,一不小心就会出假阴性.
引物也比较重要,建议引物一个为目的基因一个为载体上的
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