为什么我将一个1.5kb的基因克隆到T载体上,送去测序总是少了一截呢,每次都是少了下游引物的那一截

双酶切老是切不完全我PCR克隆了一段200bp的基因片段,然后连接到了T载体,引物2端各有EcoRI和HindIII的酶 目的基因未连接到克隆载体上这是为什么?我用的克隆载体是PMD-18! 目的基因上游引物中引入了终止密码,而原核表达载体上有ATG,这样我的目的基因能被表达出来吗? 采用通用引物对插入到质粒克隆载体中的基因片段进行测序,t3 引物读出来的数据是该基因的5'端还是3'端? 关于PCR克隆基因的引物问题 关于 克隆的问题.假如我有有一个基因片段,未知序列.我可以把它连接到T载体,然后PCR 我克隆了一个基因,序列与参考序列完全一致,我克隆的这个序列还有没有必要提交到NCBI上? TAKARA的PMD18-T载体可以用哪个通用引物验证?用了TAKARA的PMD18-T载体转入了目的片段,想用PCR验 4T-1 载体GST在基因的上游还是下游 his-tag 我的目的基因连在PET28载体上,设计引物时我把基因的终止密码子去掉,这样俩边的HIS-TAG都表达了, 利用细菌载体,克隆到一个编码植物光合作用蛋白的基因.证实该基因是否在根或其它非光合作用的组织中表达 我的生命线怎么短了跟我对象谈了后 ,我的生命线 比我以前的时候少了一厘米了 - -他的是增长了都到手腕那了.- -为什么