做pcr,如何确定最佳退火及延伸的时间和温度?

来源：学生作业帮编辑：搜搜考试网作业帮分类：数学作业时间：2024/06/23 09:17:42

延伸一般都是72° 时间是根据酶的种类和片段长度决定的
退火温度根据引物来决定一般先用55° 不行的话再往下降
再问：额，书上都这么写。但是怎么根据情况来决定呢？每次都觉得摸不着头脑。
再答：一般的taq酶是一分钟1kb 别的酶可以看看说明书是什么速度然后看你片段多大就可以算出延伸时间了啊别的没啥摸不着头脑的吧
再问：你们现在用的DNA模板，是什么来源？还经常组织块提取吗？
再答：不同实验室差别很大好不好我们主要用细胞系的cDNA
再问：呵呵，我们实验室也是诶。谢谢啦。

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