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33.细胞内DNA合成一般有两条途径:主途径(D途径)是由磷酸核糖和氨基酸等合成核苷酸,进而合成DNA,叶酸作为重要的辅

来源:学生作业帮 编辑:搜搜考试网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/06/01 02:55:47
33.细胞内DNA合成一般有两条途径:主途径(D途径)是由磷酸核糖和氨基酸等合成核苷酸,进而合成DNA,叶酸作为重要的辅酶参与这一合成过程,而氨甲蝶呤是叶酸的拮抗剂,可阻断这一过程进而抑制DNA复制;另一辅助途径(S途径)是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经次黄嘌呤酸核糖化酶(HGPRT)和胸腺嘧啶核苷激酶(TK)的催化作用合成DNA.HAT培养基含有次黄嘌呤(hypoxanthine)、氨甲蝶呤(aminopterin)和胸腺嘧啶核苷(thymidine)等物质,可以阻断特定细胞的DNA复制过程,进而选择性培养细胞.下图是单克隆抗体制备流程示意图.
(1) 与诱导植物细胞原生质体融合不同,动物细胞融合还可以采用________________诱导融合方法.
(2) 实验中所用的骨髓瘤细胞是经毒性培养基筛选出的HGPRT-(不能合成次黄嘌呤磷酸核糖转化酶)细胞株.在HAT培养基中,未融合的瘤细胞、融合的瘤细胞——瘤细胞均不能增殖并最终死亡,其主要原因是____________________.
(3) HAT培养基(液)中筛选出的杂交瘤细胞,具备___________________等特点.对上述经选择性培养的杂交瘤细胞,还需进行____________________,经多次筛选,可以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞.
(4) 体外大规模培养分离、纯化杂交瘤细胞时,通常需要将培养容器置于摇床上匀速摇动,其主要目的是____________、____________.
33.细胞内DNA合成一般有两条途径:主途径(D途径)是由磷酸核糖和氨基酸等合成核苷酸,进而合成DNA,叶酸作为重要的辅
1.灭活病毒
2这些细胞不能合成次黄嘌呤磷酸核糖转化酶,DNA合成被阻断,所以不能增殖并最终死亡.
3.可以采用补救途径合成DNA,可以在HAT培养基内存活与繁殖;单克隆抗体检测
减少细胞贴壁和接触性抑制,实现均一的细胞生长环境