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人类外周血淋巴细胞培养为什么选择培养在72H时收集细胞

来源:学生作业帮 编辑:搜搜考试网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/06/05 00:43:46
人类外周血淋巴细胞培养为什么选择培养在72H时收集细胞
(一)培养液配制(在超静工作台内无菌操作);
每个培养瓶(容积30ml)中加入5ml培养液,其中含:
RPMI1640 4ml
灭活小牛血清 1ml
PHA 2.5mg
青霉素 500U
链霉素 500ug
依次将上述试剂加入培养瓶中,反复吹打使其混合均匀,用5%NaHCO3调节培养基的pH值至7.2-7.4.
(二)血样本的采集:先以碘酒和75%乙醇消毒皮肤.用2ml灭菌注射器吸取约0.2ml肝素,作静脉穿刺,抽取外周静脉血1ml.转动针筒以混匀肝素
(三)接种:常规消毒后,立即将针头插入灭菌小瓶内,送入超净工作台 ,在火焰旁将血液滴入2~3个盛有5ml培养液的培养瓶内,每瓶0.0.3ml(6号针头45度倾斜,约20滴),盖上橡皮塞,轻轻摇动以混匀.贴好标签,将培养瓶放在37℃恒温箱内静置培养 72h .
人类外周血淋巴细胞培养为什么选择培养在72H时收集细胞
72小时是细胞分裂最旺盛的时间,这时候终止分裂,得到 的分裂相是最多的.