如何将两个外源基因导入到一个质粒载体?

来源：学生作业帮编辑：搜搜考试网作业帮分类：综合作业时间：2024/05/14 21:36:00

如何将两个外源基因导入到一个质粒载体?
有一段平末端编码人VEGF基因的DNA片段,怎样将其插入到含有EcoRI和BamH I限制位点的PET28a载体中去?插入后重组载体转化大肠杆菌DH5.
我们要插入这个外源基因,还要插入一个抗性基因来鉴定该片段已插入载体中,但是该质粒只有2个限制位点,插入VEGF基因时已经用了,那抗性基因怎么插入呢?如果还是用这两个限制位点的话,插入抗性基因时就会有可能导致VEGF基因被切除了.

我用过这个载体,这个载体上本身就有一个抗性基因,它是抗卡纳的载体,我当时用的是BamHI和HindIII切的,你可以查一下这个载体的图谱,EcorI和BamHI应该没有切开这个抗性基因.如果这个抗性基因真的被切开了,那就只能插入抗性基因了,不过做双突变载体的构建成功率比较低,我建议你可以试试看一下有没有其他的酶切位点可以把你的目的基因插入到这个载体中,如果一定要做双突变就只能查该载体中的另外两个酶切位点,而且这两个酶切位点在目的基因中不存在,如果不能满足这些条件,就不能完成双基因插入的载体构建了.

用质粒做载体将目的基因导入受体细胞后怎么办? 将目的基因导入动物细胞用到的载体只能是病毒吗?质粒可以吗? 如何将野生型细菌质粒改造成基因克隆载体如何使目的基因连接到质粒载体上,目的基因怎么获得呢? 目的基因导入受体细胞是怎样进行的?如何防止目的基因与质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接?请双基因载体连接需要将两个不同的基因同时连接到一个载体上,一般而言,是先将其中一个基因和载体相连,再将另一个载体和其相如何以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆一个编码动物激素的基因. 如何为一个已知基因选择合适的质粒载体(要求在哺乳动物中可以表达) 高中生物基因工程中目的基因导入质粒为什么质粒中要有两个标记的抗性基因如何将目的基因和质粒结合成重组质粒如何以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆一个编码蛋白的基因,并使之在大肠杆菌中表达请问将目的基因导入受体细胞中的基因枪法,是将金属粒子（被表达载体包裹）打入到细胞内?