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反转录获得cDNA后,为什么还要做RT-PCR?

来源：学生作业帮 编辑：搜搜考试网作业帮 分类：综合作业 时间：2024/06/11 06:20:29
反转录获得cDNA后,为什么还要做RT-PCR?
反转录获得cDNA后,为什么还要做RT-PCR?
这个RT是不是指realtime?
再问： 额，谢谢，不是实时定量，就是半定量的RT，我不太明白已经通过反转录拿到CDNA了，为什么要进行这个所谓的半定量呢？
再答： 你应该是要检测细胞内某种蛋白的表达吧？在这种情况下，先提取RNA，进行反转录变成cDNA，这个cDNA是细胞内的总RNA产生的。然后进行半定量ＰＣＲ的话，应该是设计要PCR的蛋白的特异性引物，然后进行PCR。PCR产物的量反应了细胞内蛋白产物的量。
我在做实时荧光定量PCR~为什么做样的时候要加入两样东西（反转录后的cDNA和质粒） 反转录cDNA第一链,进行PCR扩增,只有引物二聚体,这是为什么呢? 请问,我反转录时设置了2个循环,cdna还可以做半定量PCR吗?Actin的pcr在500bp单一条带. 2012新课标卷第40（4）反转录作用的模板是MRNA,产物是CDNA.若要在体外获得大量反转录产物,常采用PCR技术. 反转录RT-PCR的内参如何选择? 做逆转录PCR,扩增出的条带怎样区分是残留基因组DNA还是反转录得到的cDNA得到的结果 普通的RT-PCR 和荧光定量PCR,在反转录这一步是不是一样的? mRNA如何反转录成cDNA? 反转录PCR的目的我是做转基因的转出来后老板让我做反转录PCR做那个干啥啊?我想问下 对我试验有什么意义呢？ 反转录PCR和荧光定量PCR 2微克RNA反转录后的cDNA浓度大约为多少 做RNA反转录,合成cDNA第一链时,不加DTT可以吗?