酶切位点

首先要看目的基因中是否含有该酶切位点,只有没有的才可以选.其次,如果需要做表达,需要考虑起始密码子,防止移码突变；第三要考虑标签用于后面的蛋白纯化.如果仅仅用来拿到目的基因,那只需要第一点即可再问：我

按照你的表述,EcoRI酶切位点是在卡那霉素抗性基因内部?那么,如果这个抗性基因插入了你的目的基因,那么这个基因就被破坏,也就失去了卡那抗性.所以,插入了目的基因的质粒,应该是只有氨苄抗性的.所以转化

应该是吧.polyA是II型转录酶的转录终止信号,3’-UTR应该是在polyA之前.一个酶切位点也不错,你正好可以考察一下3‘UTR正反向插入,mirna对其识别、作用的效果.

那要看你做什么用,如果下一步你要构建载体的话,就需要相应的酶切位点,以便下一步操作.如果不做就没必要了.再问：只是想送去测序...为什么可以直接连接呢？再答：那就没必要加酶切位点了，因为现在的聚合酶一

15个碱基有点少,可能特异性不够高.我一般设计20个左右,加上酶切位点和保护碱基就快30了.

酶切位点多数时候是反向回文结构,因此你看到的正向序列与反向互补序列是相同的,所以在两个方向的引物上看,酶切位点序列完全一样.

很多蛋白酶的酶切位点是有一定特点的.例如胰蛋白酶水解赖氨酸和精氨酸的羧基形成的肽键,糜蛋白酶水解含有苯丙氨酸,络氨酸,色氨酸等残基的羧基形成的肽键,等等.据此,可以选择相应的蛋白酶经行酶切.

如果该ATG是翻译起始位点,就没有蛋白翻译了.如果是inframe编码,就会少一个氨基酸再问：少了一个蛋氨酸，我的蛋白就是残缺肽了。。。那样子做相互作用会有影响吗？如果有结果了，实验数据可靠不？再答：

根据我们实验收藏,原核表达载体Pet-28a比较复合你的要求,而复制载体一般用T载体吧.如果你要的是真核表达载体,我查看了PCMV系列的,都没有Ndel的多克隆位点.不太适合,不过Ndel这个限制性内

DNA合成,新链的延伸方向是5→3因此,需要在5端加上酶切位点记得再加上一些保护碱基,因为内切酶除了有特异的识别位点之外,还需多几个无需特异性的碱基提供一个platform让它可以结合上去,

Tm值本来就是人为定的一个预测值,三个Tm值代表的是不同的计算方法,常用的是第三种2*AT+4GC.看退火温度时,酶切位点和保护碱基一般是不考虑在内的,因为pcr扩增时这段序列一般是不跟模板结合的,所

比如说有酶切位点ABC你想把B给去掉就设计引物扩增出AB和BC两段不过中间包含B的那几个碱基把抹去或者换成别的然后把两段连起来然后再用AC把质粒和片段切了做连接连回去再问：会不会影响载体的功能？具体用

可以编一个简单的perl程序,进行预测.我已经编了一个,可以共享给你.

酶切位点是在引物上加入的.注意添加酶切位点的时候要在引物5'端加入,3'端要保证至少12个碱基的完全配对区域.

cicelyzh(站内联系TA)要根据距离和哪种限制酶的情况而定.有些能切开,有些不行.jwucn(站内联系TA):hand:.帮您顶一个.:hand:zqxabc(站内联系TA)可以的,临近的两个酶

那你就去找一段序列,在两边设计引物,在引物的5端挂上酶切位点序列,P完之后就能链接进去

带酶切位点的引物是算在长度内的,计算Tm值和GC含量都应将酶切位点包括在内

有何规则?superboring(站内联系TA)invitrogenoridtdnaprimerdesignprogramcanaddREsitesasrequestqwhuagongda(站内联系T

我觉得不用,而且实验中没有什么问题.

一般在人工质粒上对于某种限制酶只设置一个位点,以防止因过度消化而导致质粒断开但是一个质粒上可以同时存在多种限制酶的位点