搜搜考试网设计引物时加入flag标签,引物过长
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/04 17:41:13
Oligodt不需要设计,用试剂盒里面的就行.如果你RT的引物想用自己的,那你需要扩增的基因序列应该是明确的吧.RT的时候'引物没太多的选择性,mRNA序列跟反义链配对,因此RT的引物要根据正义链（就
完全可以,PCR长度从50bp到数百都可以,不止局限于150-300个碱基对.楼上说的有道理,但是有一点要注意,最好计算一下扩增片段的Tm值,这样做溶解曲线的时候,光有一个峰还不够,而且得到的TM和你
怎样用primer-blast设计引物http://wangyufeng222.blog.163.com/blog/static/128222070201110511213331/
用PP5.0或oligo软件.网上有很多说明书的,操作十分简单再问：等于白说
这是基础知识问题,请抬头,看本页面的导航栏,找到专题,点击进去有个引物设计专题,把上面的资料都研究透彻了,如果还不会再问.同时你也可以去生物秀论坛pcr实验版块看看,相关文章很多.………………
看你的flag抗体是否有问题,我是做抗体生产的,原来开发flag抗体时就会对其进行C端、N端、M端的Qc检测,正常情况下三端都需要有识别,我担心你的抗flag抗体有可能不识别N端,还有一种可能就是你的
ATCG.原理就是体外环境模仿人体内环境,完成人体内的DNA复制,大概就这样.
就问题本身而言,引物合成回来是固体粉末,你把它溶于水中,再做一步变性退火就行了（不过由于是hairpin,形成二聚体的可能性也很大,这个似乎不可避免）.另外我不太明白为什么要用hairpin的引物?在
载体上都带有启动子和标签的,每种载体带的标签不一样,而且是N端还是C端带或者两端都带,可以自行选择
PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列.因此,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否.要设计引物首先要找到DNA序列的保守区.同时应预测将要扩增的片段
一般要20个碱基的长度,一对,要防止形成发夹.
cDNA和mRNA的序列是互补的,如果用两个引物,最后的两条DNA序列分别对应于mRNA和cDNA中的一段.由于引物方向从5‘至3’,所以两个引物对应于mRNA和cDNA中相应序列即可.
用primerpremie
是从NCBI里面的序列库中搜索的,自动搜索符合筛选条件的序列,从而给出引物序列blast是要求NCBI里面有的序列才能验证.你研究的物种基因组测序结果发布了吗?如果发布了的话就不用担心序列不全了
首先查道你的基因序列（NCBI搜）,第二查引物设计原则,第三下载个引物设计软件设计,简单好用的有primerpremier5.0,这些都能在网上搜到,软件用法也能搜到.
我也做得RT-PCR,是提取某物种中未测序的一段基因.是用近缘物种基因进行比对,得到保守序列设计引物,再提取总RNA,RT-PCR得到目的基因的片段再问：我需要检测的分子，在nucleotide里找不
个人推荐使用PrimerPremier5
一般使用primer5就挺好,不知道你是扩基因还是启动子,基因是否是已知.PCR引物设计原理:PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列.因此,引物的优劣直接关
看产生二聚体的位置,再修改相应部分碱基..
不用太纠结,有点儿具体也是可以的,一般都能P出来.再问：很多mRNA选择设计不同长度的引物，没有一对是无found显示的，真的很让人纠结；请问文献上的引物有的也是这样吗，不完美，但能扩出来，不会影响q