蛋白电泳固定液

我以前提的蛋白用的是TCA-丙酮法,可是跑了好几次,电压都升不上去,谷友们说可能是盐离子浓度过高,但是我用超滤的方法试了,电压还是升不上去,我只有重提蛋白,（我还是想用TCA-丙酮法）但我不知大家在用

aa测序→到数据库上BLAST→预测结构功能,蛋白的性质,胞外还是胞内还是膜蛋白,相似序列相似蛋白,预测蛋白间相互作用,总之先通过数据库做大量的预测工作,好几周甚至上月,然后钓出基因做功能实验、双杂交

不知道分子量的情况下就尽可能选择浓度高的分离胶,因为浓度低的胶很有可能蛋白就跑出去了.先用高浓度的胶跑一次,然后看条带再调整下分离胶浓度再做一次就行了.另外,一般快速测定蛋白浓度的方法就是用分光光度计

不需要.使用也不用无菌.只要保证蛋白marker不被蛋白酶降解就行了.

点个预染marker就看到了

纤维素模的一面用板醋酸酐浸泡来制作醋酸纤维薄膜,醋酸面是光滑的而且另这一面的纤维素间隙减小（蛋白质进不去）,纤维素面是粗糙的（蛋白质进得去）,所以点样在粗糙面,且电泳时朝下（防止因重力作用侵入到醋酸纤

深浅表示含量的多少宽度没啥表示吧是你泳道大小决定的

不一定.可能是相同分子量的不同蛋白.

你的问题不明确,实验跑出几条带?这种电泳分离蛋白,依靠的是蛋白自身所带电荷的大小以及分子量的大小,二者共同起作用.也就是说,实验结果中显示的条带,并不代表就是一种蛋白,而可能是多种蛋白,只不过它们在这

SDS-PAGE是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术.聚丙烯酰胺凝胶由单体丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合而成,聚合过程由自由基催化完成.催化聚合的常用方法有两种：化学聚合法和光聚合法.化学聚

以醋酸纤维薄膜为支持物,浸入ph8.6的缓冲液后吸去多余液体.将微量血清点于膜上,经电泳后,将薄膜置染色液中使蛋白质固定并染色,洗去多于染料.将膜条烘干,再将其用透明液进行透明处理.用光密度计或凝胶成

可能有几个原因：一：上样缓冲液,用分子克隆上的配方做一次试试看（你所用的缓冲液是不是很久了?）二：如果你染色,脱色都没有问题,PAGE胶是不会说谎的三：不知道你是在哪种波长下所测得有数值?280nm是

1将准备好的薄膜划线面朝下,与巴比妥——巴比妥钠缓冲液中充分浸透（约30min）2,电泳开始的10min内电流调为0.3mA/CM膜宽,10min后调至0.6mA/cm膜宽.电泳60min,待电泳区带

Tris-Gly与TAE、TBE两者的离子强度不同,用来跑DNA可能不行三磷酸腺苷(站内联系TA)补充,你跑native或者EMSA胶一类的,可以用TBE跑蛋白或者蛋白－核酸复合体yaoyl0679(

①包涵体加入SDS-PAGE上样品缓冲液后,和缓冲液里的SDS及DTT一起加热会溶解.②如果是为了检测表达产物是可溶还是包涵体,在细胞破碎后离心,将上清及沉淀分别进行电泳,如果目的条带在上清中,则为可

可以依照以下几个线索分析：1,薄膜本身的质量问题（涂层不均匀等）,2,点样技术问题,3,电压电流控制问题,4,样品本身是否有降解、污染；5,实验过程其他可能影响结果的问题,如平衡时间、浸泡时间、染脱色

先是用PEG胶电泳分离不同分子量的蛋白条带,然后转移到膜上的,才能看的呀,可以用丽春红染色液染色后看,当然还可以用考马斯亮蓝进行胶体染色看血清蛋白是否全部转移到膜上.

胶配的有问题

后加电泳液的话液体溢过胶体时的流动容易把蛋白质样本冲出其所在的井.而且这样做容易在胶体四周留下液体无法进入的空隙,可能影响电泳效果.应该是这样

不用固定,染色液中乙酸就有固定的作用,染色液配方：甲醇：水：乙酸=4.5:4.5:1或5:4:1再问：请问，AC固定是起什么作用的？谢谢。。。再问：请问，AC固定是起什么作用的？谢谢。。。