考马斯亮蓝测蛋白浓度为什么出现负值

标准曲线可以自己测定的.一般试剂盒上也有啊

c=266.85A595-10.254(μg/mL),r=0.9897,实验点为8,结果如下：A595牛血清清蛋白浓度c(μg/mL)000.125250.2325500.3475750.451100

你加入的试剂的量是否一样,比如考马斯亮蓝的体积之类的.再问：考马斯亮蓝的体积是一样的，其他试剂的体积严格按照表中用移液器加入的再答：个人觉得如果你的步骤完全正确，那么吸光度在0.097-0.229之间

太浓了不好上样么.再问：是染色不好染么？上样是什么意思？再答：是先跑胶再染色么上样就是把样品加到胶孔里不知道你这是怎么测浓度对比标准品的亮度么如果浓度太大亮度没法区分开不就不好算浓度了

标准曲线制作—考马斯亮蓝法测蛋白质含量一、标准曲线一般用分光光度法测物质的含量,先要制作标准曲线,然后根据标准曲线查出所测物质的含量.因此,制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术.二、蛋白质含量测定

透明质酸中的蛋白质指的是一种蛋白聚糖中的蛋白质吗,是否应该考虑除去其中的糖胺聚糖,将蛋白质纯化,因为考马斯亮蓝需要与蛋白质结合才能显色,样品中的糖胺聚糖可能有影响,或者是样品污染考马斯亮蓝溶液应为酸性

Bradfordassay的线形关系有一定限制,在2µg/ml到120µg/ml之间才存在线形关系.你首先要确定你的稀释倍数是不是符合标准.另外,就是蛋白质本身的氨基酸构成了.

这个问题谁出的?1.原理上可以检测；用白介2标准品进行标准曲线的测定绘制标准曲线,然后通过你检测到的值推算出白介2浓度；但是前提是你的样品必须是纯的白介2!2.一般来说,检测特定蛋白浓度一般是采用其特

该方法用于大多数蛋白质的定量是比较精确的,但不适用于小分子碱性多肽的定量.如核糖核酸酶或溶菌酶.去污剂的浓度超过0．2％影响测定结果.如TritonX-100、SDS、NP-40等.1．Bradfor

1、抢存在问题2、分光光度计的问题,本来显示的就不是很稳,可多次测量取平均3、只要大于0.9950就可以了

会的.不仅碱性氨基酸,去垢剂,如SDS,还有高浓度的缓冲液都会有影响.而且由于蛋白质酸性,碱性氨基酸含量不同,即使蛋白质浓度相同,所测出的值也会不同.

裂解液（10mL）：7mol/L尿素,4.2g；2mol/L硫脲,1.522g；4%CHAPS,0.4g；50mmol/LDTT,0.075g；0.5%CA(两性电解质),125微升；100mmPMS

1.分光光度计预热下会准些2.是否调0\100,3.用紫外的试试看楼主可曾换一台分光光度计试试,有些仪器时间长了不准的

先将以有机溶剂提取的待测样品作进一步纯化,充分除去有机溶剂；然后以水或氯化钠溶解,同标准曲线法测定样品液的OD值.

考马斯亮蓝染色法测定法不会受绝大部分样品中的化学物质的影响.巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM.但受略高浓度的表面活性剂影响.若SDS高于0.1%,TritonX-100高于0.1

常规用PBS或Tris-HCl都可,其实要求不是这么严格,如果害怕缓冲溶液有影响,单独做个缓冲溶液的阴性对照就行了啊,用水溶最简单.再问：我用0.1mol/l的，ph=7.8的缓冲液，测出来的值有的0

标准曲线制作—考马斯亮蓝法测蛋白质含量一、标准曲线一般用分光光度法测物质的含量,先要制作标准曲线,然后根据标准曲线查出所测物质的含量.因此,制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术.二、蛋白质含量测定

当然不对,你可用BCA法定量

是液体就好测了呀把样品取出1ml,按照做标准曲线时一样的处理,再测OD值就行了

1.捣碎洋葱,但不能加去污剂,加去污剂会影响比色结果.过滤（假设你没有标准曲线）2.取一定量（这个其实可多可少,主要是每次分量一样就行）考马斯亮蓝G-250（别用成R-250!）,与已知浓度（浓度要小