如何选择含重组质粒的农杆菌

质粒

1.你到底是感受态没制备好呢?还是转化了,但平板上没克隆呢?2.你转一个有人转成功过的试试,排除感受态和你自己操作是不是有问题?3.你用的是哪种菌啊?LBA4404?GV3101?3抗有没有+错啊?4

一般有两种方法,一是用目的基因的特异性引物以重组质粒为模板,进行PCR扩增.看能否出现目的基因的扩增产物.还有一种是将纯化的质粒进行酶切,因为目的基因连接到载体质粒上时两边都带有人工添加的酶切位点,只

分子水平上,用人工的方法提取（或者合成）不同的生物的遗传物质,在体外切割拼接和重新组合,然后通过不同方法把重组的DNA分子引入受体细胞,使外源DNA在受体细胞进行复制与表达,按人的需要生产不同的产物或

对呀如果将细胞涂在汗抗生素的板子上（或者培养基中）,不含抗性基因的细胞就会被杀死,如果细胞成功的转染了质粒,得到了那个抗性基因,那么就不会被杀死,这个是最常用的筛选方法

淀粉苹果糖类较多为甜食品在人体内都会产生乳酸杆菌供参考.

什么叫基因重组?不去管书上的定义书上的比较狭义造成基因型变化的核酸的交换过程.包括发生在生物体内(如减数分裂中异源双链的核酸交换)和在体外环境中用人工手段使不同来源DNA重新组合的过程就叫做基因重组或

你的质粒提出来以后没有经过线性化,因此存在三种形态,超螺旋,单链开环和线性分子,其中只有线性分子可以用maker判断分子量大小,另外两种不行,如果你的质粒提的质量好的话,应该是超螺旋占优势,超螺旋会比

目的基因是利用重组质粒导入的,但大肠杆菌不一定会将它整合到自身基因中,目的基因有可能会丢失.所以质粒上需要含有标记基因,用标记基因来判断质粒有没有被整合,侧面反映目的基因有没有被整合.

土壤农杆菌是用来侵染植物的,它主要含有一个叫Ti质粒的T-DNA片段,用土壤农杆菌中的Ti质粒作为运载体．把目的基因重组人Ti质粒上的T-DNA片段中,再将重组的T-DNA插入植物细胞的染色体DNA中

你说的有道理我是生物专业的做过这个实验应该加青霉素把导入了质粒的都筛选出来还要加IPTG把导入重组质粒的和非重组质粒的分开前者的菌落是一个白斑后者的菌落是蓝斑不过你们没学这么细的话那么答没问题

错误,可以筛选.具体解释如下：筛选标记基因有两个含义,一个是对菌用,目的是筛选出阳性的工程菌,这一基因是不会插入靶细胞（即动植物细胞等）DNA序列的.第二个则是存在于T-DNA区域,将会插入靶细胞DN

重组时选择你的目的基因上没有,而质粒的多克隆位点上有的酶切位点,一般重组质粒需要两个酶,所以你要选择两个酶切位点,注意尽量避免使用切出平末端的酶.重组引物设计时首先你要确定你选择的两个酶在的酶切位点在

基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心.　　将目的基因与运载体结合的过程,实际上是不同来源的DNA重新组合的过程.如果以质粒作为运载体,　　首先要用一定

但是真核生物一般是没有内切酶的,所以整合进入的基因是不会被破坏的.转基因之后不表达一般都是由于缺少了强启动子,或者即使有启动子,但是也受到了抑制.

哎,农杆菌的机理都很清楚了.不清楚,看以看看这个网页,描述的很好.根癌农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后,可将Ti质粒上的T-DNA区域插入到植物基因组中.

筛选细胞的话是对的.但是转基因植物是不用标记基因筛选的,目的基因导入植物后,用分子杂交检验目的基因是否插入和表达,再将表达了的细胞（或组织）进行组织培养获得新植株.所以转基因植物是不用标记基因筛选的.

你直接拿没有切的质粒去转化涂板看有没有长如果长了就是连接的问题如果没长就是感受态的问题

粘性末端互补可以连接在一块不过得在用相同的限制酶切割的前提下.简单地说就是通过碱基互补配对连接的再问：谢谢,加个问题,导入受体细胞的质粒不整合进宿主细胞的染色体DNA中也能稳定遗传吗?再答：如果是整合

首先,你的质粒必须是穿梭质粒,否则不可能转的.如果是穿梭质粒的话,提取出来直接转化感受态的农杆菌就好.步骤：农杆菌感受态细胞的制备1.挑取少许农杆菌,接种于5mlLB液体培养基(含50mg/LSTR)