反转录引物 一条还是一对

1.引物设计不够特异,检查你的序列,去BLAST看看.2.退火温度过低,检查你的引物的Tm,检查你的程序设置.

看做什么用,如果以后还用到RNA的话就先保存.但是如果你要接着马上做下一步实验的话,就先反转录成cDNA比较稳定,不易降解.

理论应该用CDNA进行因为设计,但要保证你提取的mRNA的质量,尽量减少降解.可以在原序列基础上先写出互补序列再进行引物设计.

RNA

逆转录reversetranscription：以RNA以模板合成DNA的过程,是RNA病毒的复制形式,需逆转录酶的催化.其过程先以RNA为模板,合成RNA/DNA杂化双链,然后水解RNA链,再以剩下

我知道和使用过的U6内参基因只有两个：RNU6-1和RNU6-2.前一个就是常见的u6,后一个有时被称为u6b.在我的大鼠RNA样本当中,u6表达量有些太高,u6b的Cq值与我的目标miRNA比较接近

反转录酶..

反转录失败或者RNA质量不好再问：有没有可能是引物的设计不好？（引物二聚体的范围是在100bp左右）如果是cDNA反转录不好，该如何检测呢？谢谢再答：有可能是引物的问题；在P目的基因的时候，建议你同时

一个是RT-pcr,reversetranscriptionpcr的简写一个是real-time,一般不会简化为“rt-pcr”,又称实时定量pcr,Q-pcr,应该就是你说得荧光定量而你要测mRNA

有些RNA病毒不反转录有些ssRNA病毒,一旦病毒颗粒中的RNA进入寄主细胞,就直接作为mRNA,翻译出所编码的蛋白质,其中包括衣壳蛋白和病毒的RNA聚合酶.然后在病毒RNA聚合酶的作用下复制病毒RN

反转录PCR就是把RNA提取后反转录成cDNA,并以其为模板进行的PCR反应,通常用于检测某种RNA是否被表达,或者比较其相对表达水平巢式PCR（nestedPCR）,是指利用两套PCR引物（巢式引物

不,需要两条,因为随着你PCR的进行,另一条互补链会被引物扩增出来,因此你需要两条引物都加进去.再问：那么我引物设计的时候，是不是以mRNA为模版与以CDNA为模版设计的引物都可以？再答：都可以，别忘

NCBI上面得到的是mRNA序列可以用oligodt反转录,也可以用与mRNA互补的特异引物来反转录再问：恩，特异性引物有一对，上游和下游，老师问我用上游还是下游，望回答具体点再答：反转录当然是下游了

是的,是单链.想获得双链,请看如下：为具有与某RNA链呈互补的碱基序列的单链DNA即complementaryDNA之缩写,或此DNA链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链.与RNA链

逆转录生成单链DNA和MRNA的杂交链后来单链DNA在与游离的核苷酸合成双链

与3’端结合,因为新链的生成（不管是DNA复制、转录还是反转录）都是由5‘端向3’端进行的,只有引物与模板的3‘端结合,才能保证新链由5’端向3‘端生成.

区分你的模板里面是否有基因组污染的方法：在做逆转录反应的同时,做一个阴性对照,其他所有都和实验组相同,除了不加入逆转录酶.得到RT-PCR产物后跑胶,如果该阴性对照里也扩增出来明显条带的话,你的模板就

反转录病毒基因不同于一般基因,此处是人工合成的.逆转录病毒（我习惯这样说）是蛋白质,人类通过研究此蛋白质的氨基酸排列顺序,从而由遗传密码推知碱基排列顺序,及相应脱氧核苷酸排列顺序,在通过相应的化学手段

我不了解你的实际情况,我给你几条建议：1.可能是内参引物有问题2.你扩增内参基因的PCR条件设计可能有问题,如Tm3.你用的是一块胶吗?加核酸染料了吗?

反转录=逆转录反转录酶=逆转录酶反转录病毒=逆转录病毒反转录:有RNA生成DNA的过程,跟转录过程相反,所以叫反转录反转录酶:完成反转录这种过程所需要的酶反转录病毒:某些病毒是以RNA作为遗传物质,入