冻存细胞 1000转5min

首先要进行菌种活化,可以先从保存的菌种液中吸5ul,接种到加入了相应抗生素的5mlLB培养基中,200转每分钟,37摄氏度过夜.然后根据需要,如果要扩大培养,就按1:100的比例接种到大瓶的LB培养基

原代分离的细胞最好在3代以内,如果是无限传代细胞无所谓再问：有没有参考文献什么的？再答：动物细胞培养学——基本技术指南第五版科学出版社

类似情况也有过,正常去试试吧,可能行.

冻存细胞,应用液氮急冻,避免缓慢降温形成晶体破坏细胞结构,你这个做法,很匪夷所思.别等复苏了,现在赶紧拿出来活化,重新保存吧对你的补充：我拿北京大学生命科学院国家重点实验室的名义打赌,你那些师兄师姐全

、组织样品采集1.首先准备好用于包装样品的铝箔或冷冻保存管,并且用油性记号笔在铝箔或冻存管外表多处写明样品编号.2.准确切除所需组织.3.离体新鲜组织,立即剔除结缔组织和脂肪组织等非研究所需的组织类型

细胞的冻存和复苏一般是遵守“慢冻快融”.常规的慢冻方法是：1.先将冻存管放入4℃冰箱,约40min.2.接着置于-20℃冰箱,约30～60min.3.置于-80℃超低温冰箱中放置过夜.4.置于液氮罐中

可以的.一般进行生命科学实验取样时如涉及到核酸、蛋白质都要用液氮速冻,如果是RNA则还要在液氮速冻后置于-80度超低温冰箱,蛋白质或氨基酸的话液氮速冻后-20度冰箱即可.

原代细胞冻存基本技术1、选用原代细胞生长状态好(90-95%),生长数量大于5×105进行冻存.2、原代细胞冻存24小时,须换液新鲜原代细胞培养液一次.3、贴壁的原代细胞需常规用0.25%胰酶消化,将

若感受态细胞要保存备用,液氮保存最好,其次一70℃,添加20％甘油利于冷冻保存,但添加保护剂对转化率有抑制作用.

细胞冻存1.预先配制冻存液：10%DMSO+90%胎牛血清,4℃冰箱保存预冷；2.用胰酶对细胞进行消化：倒去培养瓶中的培养基或用枪小心吸去培养板中的培养基,PBS冲洗两次,用胰酶消化细胞（尽可能温和）

可以的.液氮可以将叶片速冻,使之生命活动停止,从而使可溶性糖含量处于取样时的水平.液氮速冻后存放于-20冰箱即可.

冻干是水分的升华,烘干是水分的蒸发.前者是固态直接变为气态,后者是液态变为气态,在干燥的过程里.为了最大限度的保持样品的物理结构,到目前为止最好的方法就是真空冷冻干燥.因为在低温低压状态下,样品的物理

没有问题的.我在平时做动物实验的时候,都是把所有的细胞、组织冻在一个液氮灌里的.由于液氮的温度过低,所以迅速就会封存细胞.不会造成污染.

一般不应该是质粒的问题,如果你担心是反复冻融的问题,建议分装或是在4摄氏度解冻.最容易出问题的应该是转染试剂和细胞状态.不知道你用的什么转染试剂,PEI因为带正电荷,通常来说比较容易进细胞,但是毒性较

液氮冻存最好用专用的冻存管或者稍大的冻存瓶,一般很少用塑料薄膜.但是锡箔可以用的,但是要包裹好.冻存瓶都是商品化的,有盖子.最后为了方便取出,这些东西一般都放在塑料冻存盒里.记号笔一定要用油性的,当然

必须先离心的再依次加保护液,不过我没试过把细胞直接放配好的冻存液了,估计不得行,动物细胞很脆弱的,嘎嘎

细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力.

塑料冻存管一般在上面漂着r的可以用“漏勺”捞出来.没有备用液氮罐吗?放个纱布,把液氮倒出来就行了.像天驰的液氮罐一般都配有液氮罐提筒的比较方便.

一般情况下直接用3000转离心5min就能分出血清,但是-80度冻过了,血清就离心不出来了（离心出来的上层所谓血清的部分会有点红,因为一些红细胞破裂了）血细胞和血浆的分离可以用12000rpm,离心2

细胞培养过程会出现污染或者有些细胞诱导分化只能在前20代进行,细胞冻存能够保证在细胞污染或出现其他情况时有种子细胞,当然如果你们课题组有钱也可以不用冻存,出现问题就重新买.冻存没有必须要传几代的限制,